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批复性请示范文

时间：2022-10-10 07:54:18 其他范文收藏本文下载本文

批复性请示范文（合集20篇）由网友“秃秃头秃秃”投稿提供，以下是小编帮大家整理后的批复性请示范文，仅供参考，大家一起来看看吧。

批复性请示范文

篇1：包涵体复性相关资料

包涵体复性相关资料

一、包涵体：

1.1包涵体的定义、组成与特性：

包涵体是指细菌表达的蛋白在细胞内凝集，形成无活性的固体颗粒。一般含有50%以上的重组蛋白，其余为核糖体元件、RNA聚合酶、内毒素、外膜蛋白ompC、ompF和ompA等，环状或缺口的质粒DNA，以及脂体、脂多糖等，大小为0.5-1um，具有很高的密度（约1.3mg/ml），无定形，呈非水溶性，只溶于变性剂如尿素、盐酸胍等。NMR等新技术的应用表明包涵体具有一定量的二级结构，他们可能在复性的启动阶段中具有一定的作用。[1]

1.2包涵体的形成：

主要因为在重组蛋白的表达过程中缺乏某些蛋白质折叠的辅助因子，或环境不适，无法形成正确的次级键等原因形成的。

1.2.1、基因工程菌的表达产率过高，超过了细菌正常的代谢水平，由于细菌的δ因子的蛋白水解能力达到饱和，使之表达产物积累起来。研究发现在低表达时很少形成包涵体，表达量越高越容易形成包涵体。原因可能是合成速度太快，以至于没有足够的时间进行折叠，二硫键不能正确的配对，过多的蛋白间的非特异性结合，蛋白质无法达到足够的溶解度等。

1.2.2、重组蛋白的氨基酸组成：一般说含硫氨基酸越多越易形成包涵体，而脯氨酸的含量明显与包涵体的形成呈正相关。

1.2.3、重组蛋白所处的环境：发酵温度高或胞内pH接近蛋白的等电点时容易形成包涵体。

1.2.4、重组蛋白是大肠杆菌的异源蛋白，由于缺乏真核生物中翻译后修饰所需酶类和辅助因子，如折叠酶和分子伴侣等，致使中间体大量积累，容易形成包涵体沉淀。

1.2.5、蛋白质在合成之后，于中性pH或接近中性pH的环境下，其本身固有的溶解度对于包涵体的形成比较关键，即是说，有的表达产率很高，如Aspartase和Cyanase,表达产率达菌体蛋白的30%,也不形成包涵体，而以可溶形式出现。[2]

1.2.6、在细菌分泌的某个阶段，蛋白质分子间的离子键、疏水键或共价键等化学作用导致了包涵体的形成。

1.3包涵体破菌、分离、洗涤及溶解

1.3.1基因工程菌发酵液，经离心浓缩后，可用：机械破碎、超声破碎：单纯超声破碎，在小规模下且菌量较少的情况下效果较好，由于能量传递和局部产热等原因，很难用于大体积细胞悬液的破碎，这样部分未破碎细胞与包涵体混在一起，给后期纯化带来困难。因此，在较大规模纯化时先用溶菌酶破碎细菌的细胞膜，再结合超声破碎方法，可显著提高包涵体的纯度和回收率。以及化学方法破碎使细菌裂解,然后以5000-0g 15min离心，可使大多数包涵体沉淀，与可溶性蛋白分离。

1.3.2洗涤：为了除去包涵体上粘附的杂质，如膜蛋白或核酸，应用洗涤液洗涤包涵体，通常用低浓度的变性剂,过高浓度的尿素或盐酸胍会使包涵体溶解，如2M尿素在50mM Tris pH7.0-8.5左右,1mM EDTA中洗涤。此外可以用温和去垢剂TritonX-100洗涤去除膜碎片和膜蛋白。[3]

1.3.3溶解：一般用强的变性剂如尿素（6-8M）、盐酸胍（GdnHCl 6M），通过离子间的相互作用，打断包涵体蛋白质分子内和分子间的各种化学键，使多肽伸展，一般来讲，盐酸胍优于尿素，因为盐酸胍是较尿素强的变性剂，它能使尿素不能溶解的包涵体溶解，而且尿素分解的异氰酸盐能导致多肽链的自由氨基甲酰化，特别是在碱性pH值下长期保温时。或用去垢剂，如SDS、正十六烷基三甲基铵氯化物、Sarkosyl等，可以破坏蛋白内的疏水键，也可溶解一些包涵体蛋白质。Kandula Suntha等人用TritonX-100来溶解

Zymononas mobilis levansucrase包涵体蛋白。另外，对于含有半胱氨酸的蛋白质，分离的包涵体中通常含有一些链间形成的二硫键和链内的非活性二硫键。还需加入还原剂，如巯基乙醇、二硫基苏糖醇（DTT）、

第一文库网二硫赤藓糖醇、半胱氨酸。还原剂的使用浓度一般是50-100mM 2-BME或DTT，也有文献使用5mM浓度。在较粗放的条件下，可以使用

5ml/l的浓度。还原剂的使用浓度与蛋白二硫键的数目无关，而有些没有二硫键的蛋白加不加还原剂无影响，如牛生长激素包涵体的增溶。对于目标蛋白没有二硫键某些包涵体的增溶，有时还原剂的使用也是必要的，可能由于含二硫键的杂蛋白影响了包涵体的溶解。[4]

二、复性：

由于包涵体中的重组蛋白缺乏生物学活性，加上剧烈的处理条件，使蛋白的高级结构破坏，因此重组蛋白的复性特别必要。通过缓慢去除变性剂使目标蛋白从变性的完全伸展状态恢复到正常的折叠结构，同时去除还原剂使二硫键正常形成。一般在尿素浓度4M左右时复性过程开始，到2M 左右时结束。对于盐酸胍而言，可以从4M开始，到1.5M 时复性过程已经结束。

2.1包涵体蛋白复性方法

2.1.1稀释复性：直接加入水或缓冲液，放置过夜，缺点是体积增加较大，变性剂稀释速度太快，不易控制。目前稀释法主要有一次稀释、分段稀释和连续稀释三种方式。

2.1.2透析复性：好处是不增加体积，通过逐渐降低外透液浓度来控制变性剂去除速度，有人称易形成无活性蛋白质聚体，且不适合大规模操作，无法应用到生产规模。

2.1.3超滤复性：在生产中较多的使用，规模较大，易于对透析速度进行控制，缺点是不适合样品量较少的情况，且有些蛋白可能在超滤过程中不可逆的变性。

2.1.4柱上复性：是最近研究较多并成功的在生产中应用的一种复性方法，包涵体蛋白变性后，在色谱柱上复性，大致可分成疏水柱复性及凝胶柱复性两类。其中的凝胶柱复性均是用Sephacry1S-100或Superdex75 等分子筛填料，柱较长（40cm-100cm不等）。相比稀释和透析两种方法，色谱柱复性回收率高（高达90%以上）、快速、易放大，样品稀释倍数小（一般五倍左右）[5]

2.1.5高蛋白质浓度下的复性：通常有两种方法，一是缓慢地连续或不连续地将变性蛋白加入到复性缓冲液中，使得蛋白质在加入过程中或加入阶段之间有足够的时间进行折叠复性；二是采用温度跳跃式复性，即让蛋白质先在低温下折叠复性以减少蛋白质聚集的形成，当形成聚集体的中间体已经减少时，迅速提高温度以促进蛋白质折叠复性。此外，吸附法、反胶束法和双水相萃取法等都可用蛋白质的复性。

2.2包涵体蛋白复性效率

复性是一个非常复杂的过程，除与蛋白质复性的.过程控制相关外，还很大程度上与蛋白质

本身的性质有关，有些蛋白非常容易复性，如牛胰RNA酶有12对二硫键，在较宽松的条件下复性效率可以达到95%以上，而有一些蛋白至今没有发现能够对其进行复性的方法如IL-11，很多蛋白的复性效率只有百分之零点几，如在纯化IL-2时以十二烷基硫酸钠溶液中加入铜离子（0.05%SDS，7.5-30u mol/l CuCl2）的方法，25-37°C下反应3小时，再EDTA至1m mol/l终止反应，复性后的二聚体低于1%。[6]一般说来，蛋白质的复性效率在20%左右。

2.2.1影响复性效率的因素：

2.2.1.1蛋白质的复性浓度：正确折叠的蛋白质的得率低通常是由于多肽链之间的聚集作用，蛋白质的浓度是使蛋白质聚集的主要因素，因而，一般浓度控制在0.1-1mg/ml；如果变性蛋白加入复性液中过快，容易形成絮状沉淀，可能是蛋白重新凝聚的缘故。所以我们采用再水浴和磁力搅拌下，逐滴加入变性蛋白，使变性蛋白在复性液中始终处于低浓度状态。

2.2.1.2pH和温度：复性缓冲液的pH值必须在7.0以上，这样可以防止自由硫醇的质子化作用影响正确配对的二硫键的形成，过高或过低会降低复性效率，最适宜的复性pH值一般是8.0-9.0。[12]

此外，影响复性效率的因素还有，变性剂的起始浓度和去除速度、氧化还原电势、离子强度、共溶剂和其他添加剂的存在与否等。

2.2.2提高包涵体蛋白的复性产率

2.2.2.1氧化-还原转换系统

对于含有二硫键的蛋白，复性过程应能够促使二硫键形成。常用的方法有：空气氧化法、使用氧化交换系统、混合硫化物法、谷胱甘肽再氧化法及DTT再氧化法.

最常用的氧化交换系统是GSH/GSSG,而cysteine/cystine、cysteamine/cystamine、

DTT/GSSG、DTE/GSSG等也都有应用。氧化交换系统通过促使不正确形成的二硫键的快速交换反应提高了正确配对的二硫键的产率。通常使用1-3m mol/l还原型巯基试剂,还原型和氧化型巯基试剂的比例通常为10：1―5：1。[7]

2.2.2.2添加低分子化合物

低分子化合物自身并不能加速蛋白质的折叠，但可能通过破坏错误折叠中间体的稳定性，或增加折叠中间体和未折叠分子的可溶性来提高复性产率。如盐酸胍、脲、烷基脲、以及碳酸酰胺类等，在非变性浓度下是很有效的促进剂。蛋白质的辅因子、配基或底物亦可起到很好的促折叠作用，如蛋白质的辅因子Zn2+或Cu2+可以稳定蛋白质的折叠中间体,从而防止了蛋白质的聚集，加入浓度大于0.4 mol/lTris缓冲液可提高包涵体蛋白质的折叠效率。浓度为0.4-0.6M L-Arg有助于增加复性中间产物的溶解度。成功的应用于很多蛋白如t-PA的复性中，可以抑制二聚体的形成。

NDSBs是近年来出现的可促进蛋白复性的新家族, NDSBs由一个亲水的硫代甜菜碱及一个短的疏水集团组成，故不属于去垢剂,不会形成微束,易于透析去除，目前，常用的有NDSB-195，NDSB-201，NDSB-256。[8]

2.2.2.3PEG-NaSO4两相法

用PEG和NaSO4作为成相剂,然后加入盐酸胍，再把变性的还原的蛋白质溶液加入其中

进行复性,但这种方法需复性的变性蛋白质的浓度必须低。[9]

2.2.2.4分子伴侣和折叠酶等

这类蛋白质主要包括硫氧还蛋白二硫键异构酶、肽酰-辅氨酰顺反异构酶、分子伴侣、FK506结合蛋白、Cyclophilin等。分子伴侣和折叠酶等不仅可在细胞内调节蛋白质的折叠和聚集过程的平衡，而且可在体外促进蛋白质的折叠复性。[13]

2.2.2.5其它

提高复性率的策略还有许多，如：非离子型去垢剂，尤其是离子型或两性离子去垢剂或表面活性剂CHAPs、Triton X-100、磷脂、laury lmaltosid、Sarkosyl等对蛋白质复性有促进作用；待折叠复性的蛋白质的抗体可有效协助其复性；多聚离子化合物如肝素不仅可以促进蛋白质的作用，而且具有稳定天然蛋白质的作用。[10]

2.3复性效果的检测：

根据具体的蛋白性质和需要，可以从生化、免疫、物理性质等方面对蛋白质的复性效率进行检测。

2.3.1、凝胶电泳：一般可以用非变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳可以检测变性和天然状态的蛋白质，或用非还原的聚丙烯酰胺电泳检测有二硫键的蛋白复性后二硫键的配对情况。

2.3.2、光谱学方法：可以用紫外差光谱、荧光光谱、圆二色性光谱（CD）等，利用两种状态下的光谱学特征进行复性情况的检测，但一般只用于复性研究中的过程检测。

2.3.3、色谱方法：如IEX、RP-HPLC、CE等，由于两种状态的蛋白色谱行为不同，

2.3.4、生物学活性及比活测定：一般用细胞方法或生化方法进行测定，较好的反映了复性蛋白的活性，值得注意的是，不同的测活方法测得的结果不同，而且常常不能完全反映体内活性。

2.3.5、黏度和浊度测定：复性后的蛋白溶解度增加，变性状态时由于疏水残基暴露，一般水溶性很差，大多形成可见的沉淀析出。

2.3.6、免疫学方法：如ELISA、WESTERN等，特别是对结构决定簇的抗体检验，比较真实的反映了蛋白质的折叠状态。[11]

在正常的生理条件下，组成蛋白质的多肽链都能以独特的方式进行折叠，形成自己特有的空间结构，以执行某一些生命活动。当外界环境改变时，可能造成基因突变和蛋白质序列改变，错误剪接和运输，错误折叠和异常聚积，形成对机体有害的反应，引起构象病的发生和无生物活性、不可溶的包涵体形成。目前对包涵体形成和复性过程中发生聚集的机制尚不清楚，许多已建立的高效复性方法是在反复实验和优化的基础上建立的，且没有普遍性，但从这许许多多的个例中发现了一些规律：如聚集的发生是由链间的疏水相互作用介导、聚集具有相对特异性、折叠中间体可能具有不同的作用等等，并利用这些知识建立了一些重组蛋白质高效复兴性的方法。相信随着结构生物学、生物信息学、蛋白质工程学及相关新技术和新设备的发展和完善，在不久的将来，预测和设计最佳复性方案将成为可能。

篇2：怎么批作文

怎么批作文

众所周知，最让语文老师畏难发愁的就是作文教学，当然难的不是布置作文题目，让学生写作，而是学生写完之后作文的批改。一般来说，一个语文老师要担任两个班的教学任务，甚至更多。按两个班120人计算（前几年还更多），如果作文收齐，全部由老师批改，每篇作文需要5至10分钟的时间，那么，全部改完，需要600至1200分钟，也就是10至20个小时。一个老师一周的工作量应是40小时左右，作文批改有可能占去一半的时间，那么，这样势必会影响老师们的其他工作质量。十几年的从教生涯，也一直贪恋熟悉的模式套路，坚持给学生全批全改，内心一直觉得，学生都是平等的，给这个看却不给那个看，总觉得对不起他们，所以就一直让自己“痛苦”着，不过偶尔几次心血来潮，尝试着变换了几次，效果不错，现总结出来，希望广大同仁指正。

一、坚持教师批改（一般在新接一个班级时，教师可坚持全批全改两三次，主要是摸清情况）。

二、让学生互批互改（当然老师不能大撒手，应在修改课前迅速翻阅学生的作文，了解大致情况和存在的问题，这样便于引导学生和调控学生）。

三、和学生共同批改（具体是老师也看作文只是不做修改，不打批语，只在作文纸的反面写上老师打的分数，然后让学生互批打分，再跟老师的打分比较，实践证明，有60%以上的学生打分和老师的打分能吻合）。总之，常常换换形式，既减轻了语文老师的“痛苦”，也调动了学生上作文课的兴趣，这样何乐而不为呢？

工作在我的眼中，似乎只有忙碌二字可以概括了。能静下心来做些思考的时间真是越来越少了，众多事务性的工作凝滞了自己的思维，日子就如流水般地从眼前逝去了，更加感叹岁月催人老了。

在忙完了开学初的各项基本工作后，紧接着又迎接上级部门的教育教学的调研，在检查完各项工作后，调研人员提出了许多不足之处，其中有一项就是作文的批改存在很大的问题。按照教研室的规定，作文的批改要有有针对性的眉批，评语，还要批改出文章中的错别字、病句等，总之，经过老师的评改后，学生的作文应该是比较“完善”的一篇文章了。按照这样的要求，我们班61个学生，一学期就是488篇作文，还不包括平时的练笔之作。我批改61篇作文，用了三个半天的时间，直到头晕脑涨，和我有同感的老师不在少数。对此，我一直存在疑虑，学生作文水平的提高到底是练出来的，还是老师改出来的`?我发现，老师改过的作文，学生只是看评语和分数，至于问题出在那里根本不去探究。对于这个问题我也看过许多专家的意见，真是仁者见仁智者见智，到底还是没有定论。我们也尝试着开展学生互批，老师在批改，之后学生该过老师再批阅，对学生的提高是有成效的，但是无形中老师的工作量又增加了一倍，到底何去何从呢?

一方面提高学生的作文水平是教学中的重中之重，另一方面，教条的评改要求和繁忙的工作又有一定的制约作用。也许，教育管理者更应该着眼于学生作文质量的提高，而放手让老师们尽情的发挥自己的聪明才智，不要让教条的数字成为说明问题的标志。毕竟，我们的对象是有思想有情感更有差别的学生。

敬请同行们批评指正!

篇3：批评

今天，妈妈批评了警察局的局长。为什么呢？难道我妈妈吃了豹子胆了？真令人难以相信。

晚上，妈妈跟一个人撞车，车不能动了，但我们都平安无事，真是有惊无险。车子的漆被刮掉了一大片，玻璃窗被撞碎了，后备箱也已扭曲变形，车灯也失灵了，那真是惨不忍睹。

妈妈拨打了110。十分钟过去了，还是没有一点动静。妈妈打了电话，得到了这样的回答：“你们那里太远了，我们已经在路上了。”三十分钟过去了，妈妈又是一个电话,对方说：“快到了。”好惨！看来今晚都要浪费在这个离家10里的地方了。一个小时过去了，妈妈打去电话，这次，等来的是不耐烦的回答：“又没死人，我们哪有时间来管你们这些小事？”“长安警局永远为您服务……”随后便挂了电话。现在很多人都是有口无心呀！令人寒心！

没办法中的没办法，我们走了回家。黑幕中只剩下两辆破旧的车了。

篇4：平复性疤痕治疗方法

新四联疗法：

疤痕导致过度增生的原因有外在刺激和患者本身真皮层的纤维母细胞太过活跃。新四联疗法中西结合，标本兼治。通过脉冲软镭射仪器治疗加外用药物。先松解软化疤痕结缔组织，使疤痕组织萎缩退化、平复，然后淡化色素。最终达到皮肤平整光滑，与正常皮肤颜色接近的效果。同时通过内服药调理体质，达到预防治疗疤痕的目的。

疤痕修复仪：

深圳广济疤痕诊疗中心疤痕修复仪，是专业去凹疤最有效方式。疤痕修复仪专业治疗各种凹坑，修复凹陷不平的皮肤疤痕表面，从而刺激皮肤生长，促进胶原蛋白、弹性纤维的生成，特别适用于表浅而形态单一的凹陷性疤痕。通过仪器治疗后，再加上药物治疗刺激表皮增生，最终达到面部平整光滑接近您的正常肤色。疤痕修复仪去凹疤无刺激性、无刺痛、不须麻醉、安全可靠，治疗后不产生色素变化、色素沉着等不良反应，不影响日常生活，适用于任何部位任何年龄段的不同治疗目的。

修复后注意事项：

1、凹陷性疤痕做完修复后，最重要的是修复后的保养，只有做好正确的保养才能使凹陷疤痕修复效果维持长效性。

2、治疗后首先要注重防晒，大量紫外线曝晒能让你恢复期的皮肤产生色素沉淀，让痘疤颜色更重，留得更久，因此不宜进行时间过长的户外活动。

篇5：平复性疤痕治疗方法

1、预防疤痕的第一步，就是正确的伤口照顾，不论是创伤、烫伤、皮肤感染或是手术，伤口愈合后都会产生疤痕，正确的伤口护理可以避免异常疤痕的产生。

2、于伤口拆线或伤口初步愈合后，视情况开始执行按摩疗法和压迫疗法。

3、以美容胶纸或硅胶片压贴于愈合的伤口上，美容胶纸需每天24小时贴牢，硅胶片则需贴12小时左右，贴压的范围必须大于伤口本身并包括周围的正常皮肤才有效。

4、压迫疗法可以减少伤口向外拉张的力量，使疤痕变得较平、较细。

5、按摩疗法可以使硬疤软化，并且有组织扩张的效果，可以改善凸起或有挛缩倾向的疤痕。

6、对于大面积的伤口，则可考虑紧身弹性衣的压迫治疗方法。

篇6：请示

资料管理下载公司：

我是资料管理下载用热户，房屋位于资料管理下载，总建筑面积为____平方米，其中：住宅建筑面积____平方米，超高____倍;商厅建筑面积____平方米，超高____倍;本篇文章来自资料管理下载。车库建筑面积____平方米，超高____倍;其它建筑面积____平方米，超高____倍。现申请并入资料管理下载公司集中供热管网供热，请批准!

特此申请!

申请单位(签字或盖章)：资料管理下载

201x年x月x日

篇7：请示

太原市供热管理站：

我单位内蒙古科源水务公司供水厂房。楼(附建筑概况)，详细地址：准格尔经济开发区伊东电厂热网中继泵站旁边(向北)，本篇文章来自资料管理下载。需你站供热，我单位愿承担由此产生的费用及相关义务。

申请单位：内蒙古科源水务公司

201x年x月x日

篇8：请示

×××化工厂关于贯彻按劳分配政策两个具体问题的请示

省劳动厅：

按劳分配，是社会主义分配的'基本原则，也是社会主义优越性之一。几年来，我厂由于认真贯彻了按劳分配政策，极大地激发了广大职工的社会主义劳动积极性，使得生产率成倍地增长，乃至几倍的增长。

为全面贯彻按劳分配原则，进一步调动职工的劳动积极性，现就两项劳资政策问题请示如下：

一、拟用1990年全厂超额利润的10%为全厂职工晋升工资。其中，1990年4月30日在册职工每人晋升一级，凡班(组)长和车间先进生产(工作)者及其以上领导和先进人物再依次晋升一级;全厂技术突击组成员每人浮动一级工资，组长每人浮动两级工资。

二、拟用1990年全厂超额利润的10%一次性为全厂职工每人增发奖金平均100元，具体金额按劳动出勤率和完成定额计算。

以上请示，妥否，请批示。

×××化工厂

一九九〇年十一月十日

篇9：请示

天然气管道维修的请示

公司总工办：

为了一期1#、2#、4#、5#楼不影响工期交工，室内各户厨房间天然气管道应该进入维修了，本篇文章来自资料管理下载。望总工办抓紧和xx天然气公司取得联系，确定天然气维修施工单位及时进场，切盼!

望总工办给予回复。

201x年x月x日

篇10：请示

关于在XX市举办“XX洽谈会”的请示

XX市经贸委：

为了扩大我XX商品的知名度，向全国推广，繁荣市场，满足消费者需求，拟于今年X年X月X日至X月X日在XX市举办“XX洽谈会”。洽谈会摊位共XXX平方米，展团由我公司及生产厂家派人组成，经费自理。

妥否，请批示。

XXX公司

X年X月X日

篇11：请示

计划处关于购买办公桌椅的请示

办公室：

由于本科室新到两名大学生需要购买以下办公用品：

1. 办公桌二个。

2. 椅子二把。

3. 钢笔二只。

4. 笔记本二本。

妥否，请批示

篇12：请示格式

关于在校大礼堂举办歌咏比赛的请示

尊敬的**领导：

您好。

为了丰富我院学生业余文化，选拔优秀选手参加市歌咏比赛，我院拟于xxxx年3月29日在校大礼堂举行我院第三届歌咏比赛，我院将认真组织，合理筹办，同时将努力做好安全措施，以保障此次比赛圆满完成。

妥否，请批示。

XXX学校

X年X月X日

拓展：请示格式

(一)标题

请示的标题可以由发文机关、事由、文种构成，如《省人民政府关于增拨防汛抢险救灾用油的请示》。也可以由事由和文种构成，如《关于成立老干部办公室的请示》。

(二)主送机关

请示的主送机关就是负责受理和答复请示的机关。请示在确定主送机关时，要注意以下三点：

1、主送机关只能有一个

请示一般只写一个主送机关，如需同时送其他机关，应当用抄送的形式。，受双重领导的机关向上级机关行文，应当写明主送机关和抄送机关，由主送机关负责答复其请示事项。请示如果多头行文，很可能得不到任何机关的批复。

2、只能主送上级机关，不能送领导者个人

3、不得越级

(三)正文

请示的.正文由开头、主体、结语三部分构成。

1、开头

开头主要表述请示的缘由，是上级机关批复的主要依据。一般而言，这部分要写明所遇到的新情况、新问题，或自身没有能力解决的困难，要写得充分、恰当、具体。

内容简略、篇段合一的请示，开头也可以是表达行文目的和意义的一两句话，不独立成段。

2、主体

主体是表明请示事项的部分，也是请示最核心、最重要的部分。请求指示的请示，主体要写明想在哪些具体问题、哪些方面得到指示。请求批准的请示，要把要求批准的事项分条列款一一写明。如果在请求批准的同时还需要人、财、物等方面的支持和帮助，更需要把编制、数量、途径等表达清楚、准确，以便上级及时批准。

3、结语

请示的结语比较简单，在主体之后，另起一段，按程式化语言写明期复请求即可。期复请求用语常见的有当否，请批示，妥否，请批复，以上请示，请予审批，以上请示如无不妥，请批转有关部门执行等等。

篇13：请示

销售部关于前方各处人员奖励办法的`请示

销售部长：

销售部为调动前方各处开发主机市场的积极性，在消除各经销处开发时在资源组织、快速反应及发货等方面诸多不利因素的同时，充分体现销售部由规模数量型向质量效益型转变的精神，特对各处制定如下奖励政策：

凡各处通过部现货公司款到付货销售到开发主机市场上的产品，销售价高于定价的，销售额差额部分(利润的XX%)予以奖励，其中：小型产品(产品系列按“小型产品销售政策”中的规定执行)和精密产品P5级以上(含P5级)定价为下浮XX%(P009价)，其他产品定价为下浮XX%(P009价)。

计奖办法：月奖励金额=∑(定价下浮%-实际下浮%)*P009价格(不含税)销售金额*XX%

以上请示如无不妥，请批转各前方处室、各部门执行

办公室

二O OX 年 XX 月 XX日

篇14：请示格式及参考

购买办公设备的请示报告

尊敬的领导：

按照市委工作部署，今年4月底前我县要需要完成20个村的实地测绘，工作量非常巨大，但是我局目前所用设备均为前购进，非常落后，已远无法适应工作需要，根据工作要求，现需购买BR-8新型测绘仪器6台，GF9型绘图仪1台，大型打印、复印机1台，特此报告，请领导批示拨付所需资金12万元。

此致

敬礼!

申请人：XXX

申请日期：XX年XX月XX日

篇15：请示格式及参考

xxx教育局：

我于20xx年从xx学校毕业后分配在xx区从事教育工作，在xx小学工作四年后，于20xx年7月调至xx小学工作至今。因本人工作的xx小学与家较远、丈夫不在市区工作等原因，导致小孩年幼无法照顾等实际困难，特向领导提出申请，将本人调到离家较近的xx路第一小学工作。

20xx年12月，我与在xx县上班的爱人结婚。20xx年我们按揭在xx县购置了房屋。我的父母在xx市居住，爱人的父母在xx县居住，均因年事已高，不能够来xx区与我们一起居住，不能够给我们提供任何帮助。我们的儿子今年4岁，现在市保幼院读书，我们工作繁忙，根本无法亲自接送。因为丈夫从事公安工作，无暇顾及家庭，教养儿子，以及家务劳动，都由我独自承担。因我们家至xx小学较远，长期以来，我一直在学校与家庭间奔波，疲倦之极，实在难以支撑。

为解决家庭实际困难，免除后顾之忧，更好的投身工作，我希望就近调入大公路第一小学工作。请领导批准。

此致

敬礼!

申请人：XXX

申请日期：XX年XX月XX日

篇16：请示格式

xxxx县城乡建设委员会

关于移交文化广场管理职能的请示

县政府：

文化广场(含站前集散广场及用房)总占地面积2.6公顷，总建筑面积3.7万平方米，该工程于20XX年2月动工，截至20XX年2月20日所有主体工程已全部完工，其中雕塑、喷泉、灯饰、土建、铺装已进入竣工结算阶段，已完成投资3100万元。一个月以来，文化广场已成为市民和旅客休闲聚集场所，较好地发挥了社会效益和环境效益。为尽快解决文化广场的管理与维护经费问题，特请示县政府将文化广场的管理职能移交给市政管理部门。

妥否，请批复

20XX年二月二十七日

篇17：请示格式

XX学校XXX班关于开展XXX活动的请示

XXX学校：

按照学校老师对加强社会实践的要求，为进一步提高学生动手能力，增强班级凝聚力，经年月日班会研究，经班主任同意，拟于年月日至年月日在处开展活动，届时请校领导光临指导。

当否，请批示。

XX学校XX班

年月日

篇18：请示

请示样本

请示：请示是下级向上级请求批示或批准的'公文。

格式：

1.标题。

2.称谓。

3.正文：请示的原因、请求的原因及作法。

4.结尾常用结束词：“当否”、“请批复”，“妥否”、“请批示”。最后署名、日期。

范例：关于在**某地举办“**洽谈会”的请示

某地经贸委：

为了扩大我**商品的知名度，向全国推广，繁荣某地场，满足消费者需求，拟于今年*年*月*日至*月*日在**某地举办“**洽谈会”。洽谈会摊位共“秘书工作”平方米，展团由我公司及生产厂家派人组成，经费自理。

妥否，请批示。

“秘书工作”公司

*年*月*日

篇19：请示格式

（一）请示的概念与适用范围

请示是“适用于向上级机关请求指示、批准”的上行文，具有强制回复的性质。其适用范围主要包括：

（1）需要请求上级解决本单位、本部门的某个具体问题。

（2）上级对某个事项已有明文规定，但必须经请示有关部门批准才能办理。

（3）在本单位职权范围内不能决定或解决的问题，需请求上级授权或批准处理。

（4）对事关重大、需上级审核或审定的问题，如机构设置、人员编制、干部任免、大额资金划拨等，也需要请示。

（5）从本地区本单位的实际情况出发，需要对上级的某项政策、规定做出变通处理，有待上级重新审定，明确作答。

（6）对上级有关方针、政策、规定等有不明之处或有不同理解，需要上级机关做出明确解释和答复。

（7）在工作中出现新情况、新问题需要处理而无章可循、无法可依，需要上级机关做出明确指示。

（8）工作中出现了一些涉及面广而本部门无法独立解决的困难和问题，必须请示上级机关或综合部门，由上级机关或综合部门协调处理。

（9）对带有普遍性、全局性的问题，本部门提出了解决的办法，请求上级予以批转各相关单位遵照执行。

（二）请示的特点

1.请求性请示是向上级机关请求指示和批准的公文，具有请求的性质。

2.求夏性请示的目的是请求上级指示、批准，解决具休问题，要求上级做出明确批复。

3.预先性请示必须在事前行文，一般情况下不允许“先斩后奏”，如果因时间紧迫无法事前行文，事后也必须补上。

4.单一性请示应当一文一事，如果请示的是几件事，则必须是与同一个问题紧密相关的几个方面，上级能一次性批复或解决。同一请示一般只写一个主送机关，如需同时送其他机关的，应当用抄送形式，但不得抄送其下级机关。

（三）请示的种类

1.请求批准的请示如“适用范围中”所列举的第1至第4种。 2.请求指示的请示如“适用范围中”所列举的第5至第8种。 3.请求批转的请示如“适用范围中”所列举的第9种。

（四）请示的写法

1.标题由“发文机关（可省略）十事由＋请示”组成。如“关于 xxx的请示”。

2.正文正文的开头先简要写明请示的依据、原因等，然后写明请求的事项，要求有理有据，既有问题的阐述，又有解决的思路，提出的看法或处理意见要具休明确、切实可行，不能把矛盾和问题推给上级。结尾提出明确请求，多用请求语，如“以上要求，请予批准”，“以上意见，请予批示”，“妥否，请批示”，“如无不妥，请批转有关单位执行”等。

（五）请示的写作要求

1.遵守行文规则使用请示时不要多头请示，不要越级请示，不要向上级领导个人请示，不要事后请示，不要同时抄送下级机关。

2.理由充分有力请求的事项要得到上级的批准，必须有充分的、具有说服力的理由，因此，应充分说明请求的必要性，引起上级的重视，促使问题得到及时解决。提出请求事项时，应对所请示的问题提出初步意见与方案，供领导批复时参考。在自己职权范围内可以解决的事情，要勇于负责，不要事事请示。

3.注意文辞语气行文态度要恳切，文辞要谦恭得体，语气要谦和，分寸要得当，不能用命令、催促式口吻。

4.不与报告混用报告和请示都是上行文，都是向上级说明情况，使用时容易混用，必须区分二者的用法和写法，不能将请示写成报告，如“关于某某事项的请示报告”。

xx省人民政府关于申请国家水稻良种补贴的请示

x政报2O05 124号

国务院：

我省是一个以粮食生产为主的农业省区，是全国水稻生产大省之一。全省常年粮食播种面积5 000万亩、总产量1 500万吨左右。其中水稻播种面积 3 20。万亩，位居全国第三；总产量1 200万吨，位列全国第七。早稻面积1 671万亩，约占全国早稻播种面积的20写，仅次于湖南省，列全国第二位。近年来，我省稻谷生产保持相对稳定，不仅大大提高了我省粮食的自给水平，为农业结构战略性调整和促进农民增收奠定了基础，而且每年还可向广东等沿海省市和港澳地区供应大量的优质稻米，年输出商品粮达50亿公斤，为国家的粮食安全做出了贡献。因此，我省水稻生产在全省乃至全国粮食生产中具有重要的意义。

但是，由于我省农业基础设施建设比较落后，粮食生产受自然灾害因素制约仍然很大，加之我省属经济后发达地区，农民收入水平较低，投入能力十分有限，造成新品种、新技术的推广应用速度不快，在一定程度上影响了粮食生产科技水平和良种普及率的提高，导致我省目前粮食生产水平不高，单产低于全国平均水平。特别是随着我国加入东盟自由贸易区，位于东盟前沿的我省水稻生产一方面受到东盟国家如泰国、越南等世界稻米生产大国的直接冲击，另一方面随着国家将湖南、湖北、江西等省份列入国家优质粮食工程主产区进行扶持，将进一步拉大我省与这些省份的差距，使我省水稻生产面临内外夹击的不利局面。

鉴于以上实际情况，为进一步支持和帮助我省发展粮食生产，加快良种推广应用步伐，促进粮食稳定增产和农民持续增收，特请求国家从起将我省纳入水稻良种补贴省区，并申请国家20安排给我省水稻良种补贴专项资金2. 6亿元。补贴资金将全部用于对全省60个水稻主产县（市、区）的.农户进行直接补贴，补贴总面积2 600万亩，每亩补贴10元。

专此请示，敬请审批。

xx省人民政府（盖章）

二 O**年x月x日

拓展阅读：请示的写作方法

一、什么是请示

请示，向上级请求指示。请示是下级机关对某项工作、某件事情作出的决定，需要上级审核和批准时，所常使用的一种公文样式。

请示在日常工作和生活中使用率极高。下级机关的工作都是在上级机关的直接领导下进行的，有些事情在局部看来从本机关的角度来考虑是可行的，但是上级领导机关从全局考虑就不一定可行。在此种情况下，下级想办的事情中有不少自己决定办之前尚要上级审批后才可行动。这就要写请示，办理审批手续。请示，在一个机关，甚至一个机关的内部的各个基层单位都要经常使用它，有时同时写几个：至于小事当面向领导请示，要求当面答复和解决的事情更是屡见不鲜。因此，学点请示的写作知识对每一位在企事业单位工作的干部，甚至职工都是必要的。

二、怎样写好请示

先把握住清示的特点。

请示，有如下三个特点：

（1）请示都是上行文。即下级向上级行文才使用它，尽管有的不是直属上下级关系，可是属于业务主管机关。比如，某学院同河南省文化厅出版处不属于上下级机关，但在业务上省文化厅出版处领导我们，印刷教材之前要写清示，请求审批。

（2）请示中的事情务必是在自己职权范围内无法肯定和处理的事情。有法处理，又允许处理的事情，就不要事无巨细都写请示。

（3）请示都要求上级或业务主管部门批复，表明态度。

第二要知道请示的使用范围。

一般说来，在下面五种情况下要使用清示：

（1）根据自己的工作安排急需办某件事，但又需上级批准后才可办的，此时要写请示。

（2）工作中发生了比较重大的问题，本机关无权决定解决。自己可先提出处理意见，请求批示。

（3）对于上级颁发的法律、法令、方针、政策、规定和上级指示精神中有不了解、有疑问，或不同理解的问题，需要上级机关解释和进一步明确时，要用请示。

（4）上级有文件规定不经请示不允许办的事情，而本单位又不能不办，此时要写请示。