线粒体DNA的异质性与检测方法

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线粒体DNA的异质性与检测方法

篇1:线粒体DNA的异质性与检测方法

线粒体DNA的异质性与检测方法

线粒体DNA的异质性在生物学、医学、法医、生物技术等领域有重要的应用.本文从自然发生(包括体细胞突变、父系渗入和杂交)和人工产生(包括转基因、细胞融合、核移植和转线粒体)两大方面系统地介绍了线粒体DNA异质性的产生机制及其遗传.并介绍了线粒体DNA异质性的检测方法,已知突变位点mtDNA异质性的检测方法有原位PCR技术、PCR-RFLP和实时荧光定量PCR技术,未知突变位点mtDNA异质性的`检测方法有长PCR技术、时相温度梯度凝胶电泳(TTGE)和变性高效液相色谱(DHPLC)等.最后对克隆生物中线粒体异质性检测的应用实例作了介绍.

作 者:刘艳 胡婧 黄原 LIU Yan HU Jing HUANG Yuan  作者单位:陕西师范大学生命科学学院,西安,710062 刊 名:动物学杂志  ISTIC PKU英文刊名:CHINESE JOURNAL OF ZOOLOGY 年,卷(期): 41(5) 分类号:Q95 关键词:mtDNA   异质性   父系渗入   细胞融合   核移植   转线粒体   检测  

篇2:基于棉花BAC文库的线粒体DNA的提取方法

基于棉花BAC文库的线粒体DNA的提取方法

以棉花的黄化苗为材料,根据棉花自身的特点,利用差速离心的.方法分离线粒体后再经低熔点琼脂糖包埋裂解提取了完整的mtDNA.其质量完全可以满足BAC文库构建中限制性酶切、PCR检测、分子杂交筛选等实验的要求.

作 者:冯娜 罗淑萍 郭三堆 FENG Na LUO Shu-ping GUO San-dui  作者单位:冯娜,FENG Na(中国农业科学院,生物技术研究所,北京,100081;新疆农业大学,农学院,乌鲁木齐,830052)

罗淑萍,LUO Shu-ping(新疆农业大学,农学院,乌鲁木齐,830052)

郭三堆,GUO San-dui(中国农业科学院,生物技术研究所,北京,100081)

刊 名:新疆农业大学学报  ISTIC PKU英文刊名:JOURNAL OF XINJIANG AGRICULTURAL UNIVERSITY 年,卷(期):2006 29(3) 分类号:Q74 关键词:棉花   提取   线粒体DNA   BAC文库  

篇3:蟹类线粒体DNA的研究与应用

蟹类线粒体DNA的研究与应用

线粒体DNA作为理想的分子遗传标记已被广泛用于蟹类种群遗传学和进化遗传学的研究,并取得了许多有意义的'结果.本文阐述了蟹类线粒体DNA分子生物学的研究进展,重点介绍蟹类线粒体DNA序列的研究概况及其多态性在蟹类系统学、种群识别、起源和进化、地理分化等研究中的应用情况.

作 者:徐敬明 XU Jing-Ming  作者单位:中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室,山东,青岛,266003;临沂师范学院生命科学学院,山东,临沂,276005 刊 名:中国海洋大学学报(自然科学版)  ISTIC PKU英文刊名:PERIODICAL OF OCEAN UNIVERSITY OF CHINA 年,卷(期): 36(6) 分类号:Q959.223 关键词:蟹类   线粒体DNA   多态性   分子进化  

篇4:用dHPLC技术检测线粒体DNA编码区单核苷酸多态性

用dHPLC技术检测线粒体DNA编码区单核苷酸多态性

目的.研究线粒体DNA(mtDNA)编码区单核苷酸多态性,建立检测mtDNA编码区单核苷酸多态性(SNP)的变性高效液相色谱(dHPLC)方法.方法设计针对线粒体DNA编码区nt10287-10679及nt8507-8805引物,应用dHPLC技术检测其序列多态性.结果100例中国汉族无关个体中,mtDNA nt10287-10679检出13个SNP位点,13种单倍型,基因多样性(H)为70.79%,偶合概率(P)为29.92%;mtDNA nt8507-8805检出10个SNP位点,12种单倍型,H为70.42%,P为30.28%;两段序列联合起来共检出23个SNP位点,23种单倍型,H为84.14%,P为16.70%.结论所建立的dHPLC方法可用于快速、准确地检测mtDNA编码区序列多态性;mtDNA编码区多态性位点作为mtDNA控制区多态性位点的补充,联合应用可以提高mtDNA的个体识别能力.

作 者:刘雅诚 郝金萍 严江伟 唐晖 王静 任嘉诚  作者单位:刘雅诚,严江伟,唐晖,王静,任嘉诚(北京市公安局法医检验鉴定中心,北京,100085)

郝金萍(公安部物证鉴定中心,北京,100038)

刊 名:中国法医学杂志  ISTIC PKU英文刊名:CHINESE JOURNAL OF FORENSIC MEDICINE 年,卷(期):2006 21(3) 分类号:Q3 关键词:法医物证学   线粒体DNA编码区   单核苷酸多态性   变性高效液相色谱  

篇5:马铃薯亚细胞结构线粒体DNA的分离与提取

马铃薯亚细胞结构线粒体DNA的分离与提取

以马铃薯块茎为材料,通过差速离心分离出线粒体,过垫梯度离心进一步纯化.显微镜下观察所得的线粒体的`纯度、形态;并用数码相机进行照相.线粒体样用SDS、蛋白酶K、核酸酶处理后用饱和酚、苯酚/氯仿及氯仿/异戊醇提取处理,乙醇沉淀,提取得线粒体DNA(mtDNA).紫外分光光度计检测提取浓度、纯度,1%琼脂糖电泳获得清晰、整齐的条带.

作 者:卢太白 韦伟 徐雷 LU Tai-bai WEI Wei XU Lei  作者单位:西北农林科技大学生命学院,陕西杨凌,712100 刊 名:西北农业学报  ISTIC PKU英文刊名:ACTA AGRICULTURAE BOREALI-OCCIDENTALIS SINICA 年,卷(期): 15(5) 分类号:Q503 Q523 关键词:线粒体   mtDNA   差速离心   过垫梯度离心  

篇6:洞庭青鲫与其他六个鲫鱼品系线粒体DNA控制区的比较分析

洞庭青鲫与其他六个鲫鱼品系线粒体DNA控制区的比较分析

运用PCR扩增、克隆、测序等技术,在获得洞庭青鲫和彭泽鲫线粒体DNA控制区全序列的基础上,对洞庭青鲫、彭泽鲫、普通鲫、红鲫、白鲫、A系和D系银鲫等7个鲫鱼品系线粒体DNA控制区的`碱基组成、变异情况、序列结构和系统进化进行了比较分析.结果表明,7个鲫鱼品系线粒体DNA控制区碱基的平均组成为A:(32.7±0.16)%,C:(20.4±0.37)%,G:(14.1±0.08)%,T:(32.8±0.36)%,序列分歧率为0-5.7%,其中红鲫和白鲫的分歧率最大(5.7%),彭泽鲫、A系和D系银鲫之间最小(0).洞庭青鲫与白鲫的分歧率为5.6%,与彭泽鲫、A系和D系银鲫为2.2%,与红鲫和普通鲫分别为0.8%和0.7%.对比哺乳动物线粒体DNA控制区结构,并参照其他鱼类序列,将7个鲫鱼品系的控制区分为终止序列区、中央保守区和保守序列区三个区域.同时识别了7个鲫鱼品系中一系列保守序列,并给出了它们的一般形式.序列差异和系统进化分析表明,在7个鲫鱼品系中,洞庭青鲫与普通鲫和红鲫的亲缘关系最近,与彭泽鲫、A系和D系银鲫亲缘关系次之,与白鲫的亲缘关系最远,而彭泽鲫、A系和D系银鲫三者在线粒体DNA控制区的相似性和分歧率上则表现为是同一个鲫鱼品系.

作 者:刘良国 杨品红 王文彬 王晓艳 谢春华 李梦军 LIU Liang-Guo YANG Pin-Hong WANG Wen-Bin WANG Xiao-Yan XIE Chun-Hua LI Meng-Jun  作者单位:刘良国,王文彬,LIU Liang-Guo,WANG Wen-Bin(湖南文理学院生命科学学院,常德,415000)

杨品红,YANG Pin-Hong(湖南文理学院生命科学学院,常德,415000;湖南省水产工程技术研究中心,常德,415000)

王晓艳,谢春华,李梦军,WANG Xiao-Yan,XIE Chun-Hua,LI Meng-Jun(湖南省水产工程技术研究中心,常德,415000)

刊 名:水生生物学报  ISTIC PKU英文刊名:ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA 年,卷(期): 34(2) 分类号:Q347 关键词:洞庭青鲫   鲫鱼品系   线粒体DNA   控制区   系统进化   Carassius auratus Dongtingking variety   Strains of Carassius auratus   Mitochondrial DNA   Control region   Phylogeny  

篇7:线粒体DNA单倍型与广西壮族自治区巴马地区长寿的关联

线粒体DNA单倍型与广西壮族自治区巴马地区长寿的关联

人类长寿显示明显的母系遗传倾向,即女性长寿者比男性多,而线粒体DNA(mtDNA)也有严格的'母系遗传规律,广西壮族自治区(广西)巴马县是世界自然医学会确认的五大长寿地区之一,近年备受各界关注.我们于4月至11月拟通过检测巴马地区壮族长寿老人的mtDNA单倍型的多态性,探讨mtDNA在长寿中的作用.

作 者:潘尚领 陈晶 尹瑞兴 刘承武 黄龄瑾 陈文成 罗小秋 陈进超 黄必冠 罗毅  作者单位:潘尚领,陈晶,刘承武,黄龄瑾,陈文成,罗小秋(530021,广西医科大学病理生理学教研室)

尹瑞兴(广西医科大学第一附属医院心血管研究所)

陈进超(广西壮族自治区巴马县长寿研究所)

黄必冠,罗毅(广西壮族自治区东兰县人民医院)

刊 名:中华老年医学杂志  ISTIC PKU英文刊名:CHINESE JOURNAL OF GERIATRICS 年,卷(期): 25(5) 分类号:Q3 关键词: 

篇8:二极管的识别与检测方法

来源: | 时间:2012年06月07日

1 二极管的作用与识别方法

1.1 作用

二极管的主要特性是单向导电性,也就是在正向电压的作用下,导通电阻很小;而在反向电压作用下导通电阻极大或无穷大。

二极管按用途分为:晶体二极管、双向触发二极管、高频变阻二极管、变容二极管、发二极管、肖特基二极管。

1.2 识别方法

二极管的识别很简单,小功率二极管的N极(负极),在二极管表大多采用一种色圈标出来,有些二极管也用二极管专用符号标志为“P”“N”来确定二极管极性的,发光二极管的正负极可从引脚长短来识别,长脚为正,短脚为负。

1.3 测试注意事项

用数字式万用表支测二极管时,红表笔接二极管的正极黑表笔接二极管的负极,此时测试得阻值才是二极管的正向导通阻值,这与指针式万用表的表笔接法刚好相反。

1.4 故障特点

二极管的故障主要表现在开路、短路和稳压不稳定。在这3种故障中,前一种故障表现出电源电压升高;后顾之忧种故障表现为电源电压变低到零伏或输出不稳定。

2 二极管的测试方法

2.1 检测小功率晶体二极管

A.判别正、负电极

(a)观察外壳上的符号标记。通常在二极管的外壳上标有二极管的符号,带有三角形箭头的一端为正极,另一端是负极。

(b)观察外壳上的色点。在点接触二极管的外壳上,通常标有极性色点(白色或红色)。一般标有色点的一端即为正极。还有的二极管上标有色环,带色环的

一端则为负极。

(c)以阻值较小的一次测量为准,黑表笔所接的一端为正极,红表笔所接的一端则为负极。

B.检测最高反向击穿电压。对于交流电来说,因为不断变化,因此最高反向工作电压也就是二极管承受的交流峰值电压。

2.2 检测双向触发二极管

将万用表置于相应的直流电压挡。测试电压由兆欧表提供。测试时,摇动兆欧表,万同样的方法测出VBR值。最后将VBO与VBR进行比较,两者的绝对值之差越小,说明被测双向触发二极管的对称性越好。

2.3 瞬态电压抑制二极管(TVS)的检测

A.用万用表测量管子的好坏对于单要极型的TVS,按照测量普通二极管的方法,可测出其正、反向电阻,一般正向电阻为4kΩ左右,反向电阻为无穷大。 对于双向极型的TVS,任意调换红、黑表笔测量其两引脚间的电阻值均应为无穷大,否则,说明管子性能不良或已经损坏。

2.4 高频变阻二极管的检测

识别正、负极高频变阻二极管与普通二极管在外观上的区别是其色标颜色不同,普通二极管的色标颜色一般为黑色,而高频变阻二极管的色标颜色则为浅色。其极性规律与普通二极管相似,即带绿色环的一端为负极,不带绿色环一端为正极。

2.5 变容二极管的`检测

将万用表红、黑表笔怎样对调测量,变容二极管的两引脚间的电阻值均应为无穷大。如果在测量中,发现万用表指针向右有轻微摆动或阻值为零,说明被测变容二极管有漏电故障或已经击穿坏。

2.6 单色发光二极管的检测

在万用表外部附接一节能1.5V干电池,将万用表置R×10或R×100挡。这种接法就相当于给予万用表串接上了1.5V的电压,使检测电压增加至 3V(发光二极管的开启电压为2V)。检测时,用万用表两表笔轮换接触发光二极管的两管脚。若管子性能良好,必定有一次能正常发光,此时,黑表笔所接的为正极红表笔所接的为负极。

2.7 红外发光二极管的检测

A.判别红外发光二极管的正、负电极。红外发光二极管有两个引脚,通常长引脚为正极,短引脚为负极。因红外发光二极管呈透明状,所以管壳内的电极清晰可见,内部电极较宽较大的一个为负极,而较窄且小的一个为正极。

B.先测量红个发光二极管的正、反向电阻,通常正向电阻应在30k左右,反向电阻要在500k以上,这样的管子才可正常使用。

2.8 红外接收二极管的检测

A.识别管脚极性

(a)从外观上识别。常见的红外接收二极管外观颜色呈黑色。识别引脚时,面对受光窗口,从左至右,分别为正极和负极。另外在红外接收二极管的管体顶端有一个小斜切平面,通常带有此斜切平面一端的引脚为负极,另一端为正极。 (b)先用万用表判别普通二极管正、负电极的方法进行检查,即交换红、黑表笔两次测量管子两引脚间的电阻值,正常时,所得阻值应为一大一小。以阻值较小的一次为准,红表笔所接的管脚步为负极,黑表笔所接的管脚为正极。

B.检测性能好坏。用万用表电阻挡测量红外接收二极管正、反向电阻,根据正、反向电阻值的大小,即可初步判定红外接收二极管的好坏。

2.9 激光二极管的检测

A.按照检测普通二极管正、反向电阻的方法,即可将激光二极管的管脚排列顺序确定。但检测时要注意,由于激光二极管的正向压降比普通二极管要大,所以检测正向电阻时,万用表指针公略微向右偏转而已。

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