噬菌体抗体库固相筛选条件的初步研究（通用9篇）由网友“王可达”投稿提供，下面是小编精心整理的噬菌体抗体库固相筛选条件的初步研究，仅供参考，大家一起来看看吧。
篇1：噬菌体抗体库固相筛选条件的初步研究
噬菌体抗体库固相筛选条件的初步研究
目的:探讨噬菌体抗体库的固相筛选条件,为筛选方案的`设计提供实验依据.方法:利用多种针对HEV NE2蛋白的特异性噬菌体人源抗体和非特异性噬菌体人源抗体,对噬菌体抗体与抗原的结合时间、抗原包被的浓度、洗涤强度和洗脱方式等多种筛选的条件进行初步探索.结果:阳性噬菌体抗体与抗原反应1 min,就可较好结合,洗涤次数为20～30次、洗涤液的pH为5时,筛选得到的阳性率最高.包被抗原的浓度对筛选的阳性率没有明显影响,用10 mg/L抗原竞争洗脱60 min,可得到较高的阳性率.结论:噬菌体抗体库的筛选是一个非常复杂的过程,其中的各个条件之间有着密切的联系,应该根据具体情况进行调整.
作 者：王明桥 罗文新 陈瑛炜 袁权 王晋 张军 夏宁邵 WANG Ming-qiao LUO Wen-xin CHEN Ying-wei YUAN Quan WANG Jin ZHANG Jun XIA Ning-shao 作者单位：福建省医学分子病毒学研究中心,厦门大学教育部细胞生物学与肿瘤细胞工程重点实验室,福建,厦门,361005 刊 名：细胞与分子免疫学杂志 ISTIC PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF CELLULAR AND MOLECULAR IMMUNOLOGY 年，卷(期)： 22(5) 分类号：Q782 关键词：噬菌体抗体库 固相筛选 筛选条件篇2：多样性人源天然噬菌体抗体库的构建及初步应用
多样性人源天然噬菌体抗体库的构建及初步应用
目的: 构建多样性良好的人源天然噬菌体抗体库.方法: 从正常人外周血中分离淋巴细胞, 以RT-PCR和半巢式PCR扩增重链可变区VH基因和轻链可变区VL基因, 以重叠延伸PCR将VH、VL组装成scFv基因, 并将其克隆入噬菌粒载体pCANTAB-5E中.以pCANTAB-5E电转化大肠杆菌TG1, 构建人源天然噬菌体抗体库, 测序分析抗体基因的家族信息和多样性, 并用多种抗原对其进行筛选.结果: 获得了库容为2×108的人源天然噬菌体抗体库.分别用5种抗原对其进行筛选, 均可获得特异性噬菌体抗体的富集.结论: 成功地构建了一个多样性良好的`人源天然噬菌体抗体库, 可用于制备具有应用前景的人源抗体.
作 者：王晋 罗文新 李利峰 陈瑛炜 王明桥 张军 夏宁邵 WANG Jin LUO Wen-xin LI Li-feng CHEN Ying-wei WANG Ming-qiao ZHANG Jun XIA Ning-shao 作者单位：厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,福建省医学分子病毒学研究中心,福建,厦门,361005 刊 名：细胞与分子免疫学杂志 ISTIC PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF CELLULAR AND MOLECULAR IMMUNOLOGY 年，卷(期)：2006 22(6) 分类号：Q782 关键词：人源天然噬菌体抗体库 单链抗体 多样性篇3：全合成人源性噬菌体抗体库的构建
全合成人源性噬菌体抗体库的构建
目的:构建全合成人源性噬菌体抗体库.方法:选择部分使用频率较高的人抗体胚系基因家族的框架区基因进行人工合成,同时人工设计合成半随机CDR3,通过重叠拼接延伸PCR的方法合成抗体基因.然后利用限制性内切酶SfiⅠ、NotⅠ分别双酶切抗体基因和噬菌体展示载体.连接后的重组噬粒通过电击转化的`方法转入大肠杆菌TG1,构建抗体库.结果与结论:PCR结果显示,通过优化后的方法能在保证抗体库多样性的前提下,高效地获得抗体基因.经过数十次电击转化构建了库容量为2×109的全合成抗体库,菌落PCR、测序及筛选结果表明,抗体库质量优良,为筛选人源性治疗抗体奠定了基础.
作 者：杜威世 王双 孙志伟 俞炜源 DU Wei-Shi WANG-Shuang SUN Zhi-Wei YU Wei-Yuan 作者单位：军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071 刊 名：军事医学科学院院刊 ISTIC PKU英文刊名：BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES 年，卷(期)： 30(4) 分类号：Q782 关键词：噬菌体展示 全合成抗体库 单链抗体篇4：石油降解细菌的筛选及培养条件的初步研究
石油降解细菌的筛选及培养条件的初步研究
从大庆油田分离纯化出7株能以石油作为唯一碳源的石油降解细菌,并对降解能力进行研究,发现各菌株均能产表面活性剂,其中油膜面积大于3 cm的`菌株有PW01、PS01、PS02、PS04、PS05 5株细菌,各菌株均能产酸.摇瓶培养菌株PW01 7 d,发现其对石油降解率高达68.33%,最适氮源为NH4Cl、最适磷源为1∶1的KH2PO4/K2HPO4,在此基础上设计正交试验,极差R大小比较发现各因素对菌株PW01的石油降解率影响次序为:石油>KH2PO4/K2HPO4>NH4Cl.
作 者：慕庆峰 洪音 Mu Qingfeng Hong Yin 作者单位：黑龙江八一农垦大学植物科技学院,大庆,163319 刊 名：黑龙江八一农垦大学学报 英文刊名：JOURNAL OF HEILONGJIANG AUGUST FIRST LAND RECLAMATION UNIVERSITY 年，卷(期)： 20(3) 分类号：X172 关键词：菌株筛选 石油降解 正交设计篇5：噬菌体展示技术筛选DNA错配修复蛋白MutS高亲和性抗体
噬菌体展示技术筛选DNA错配修复蛋白MutS高亲和性抗体
目的制备MutS的高亲和抗体,以有利于MutS的检测及应用.方法利用IPTG的诱导作用,在E.coli中诱导表达目标蛋白MutS.利用亲和层析方法获得目标蛋白,并利用凝胶阻滞实验分析其活性.将MutS作为抗原,在Tomlinson抗体库中利用噬菌体展示技术来筛选MutS的高亲和力噬菌粒.将其转化到大肠杆菌后,诱导表达并通过亲和层析的.方法来获得可溶性的抗体片段,并检测其亲和力.结果纯化后的MutS具有识别、结合错配DNA双链的活性.ELISA分析表明,利用噬菌体展示技术可获得MutS高亲和力的噬菌粒.将其转化到大肠杆菌HB2151后,诱导表达并纯化到抗体片段,其亲和力为0.9×108 L/mol.结论利用噬菌体展示技术筛选到MutS高亲和力的抗体.
作 者：刘俊 全智勇 刘建华 LIU Jun QUAN Zhi-yong LIU Jian-hua 作者单位：上海交通大学生命科学与技术学院,上海,40 刊 名：复旦学报（医学版） ISTIC PKU英文刊名：FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES 年，卷(期)： 33(4) 分类号：Q81 关键词：噬菌体展示 DNA错配修复蛋白MutS 可溶性抗体片段篇6：城市绿地种子库的初步研究
城市绿地种子库的初步研究
对城市绿地土壤种子库的'组成、种群数量、空间分布和物种多样性进行了初步研究,结果表明:城市绿地土壤种子库存中共出现植物42种,其中在第一层中共出现植物1 477株,多样性指数为2.05,均匀度是0.58,最大的物种多样性指数是3.56,第二层的物种多样性指数,均匀度和最大物种多样性指数均比第一层要低,分别为1.94、0.56和3.47,植物种类也要少一些.城市绿地土壤种子库中种的丰富度、种子苗量、多样性指数均不如远郊区山地天然次生林.城市绿地土壤种子库中蕴藏着一些潜在种群,有些植物种可以用于城市绿化建设.
作 者：王杰青 关崇 祝宁 WANG Jie-Qing GUAN Chong ZHU Ning 作者单位：王杰青,WANG Jie-Qing(苏州大学城市科学学院,苏州,215213)关崇,祝宁,GUAN Chong,ZHU Ning(东北林业大学林学院,哈尔滨,150040)
刊 名：植物研究 ISTIC PKU英文刊名：BULLETIN OF BOTANICAL RESEARCH 年，卷(期)：2006 26(4) 分类号：Q94 关键词：城市绿地 土壤种子库 天然次生林篇7：噬菌体展示筛选修饰nNOS活性多肽的研究
噬菌体展示筛选修饰nNOS活性多肽的研究
多种疾病的病理过程涉及脑型一氧化氮合酶(nNOS)的活性改变.为了寻找特异的nNOS调控分子,将nNOS的钙调素结合区以大肠杆菌(E.coli)表达,表达蛋白经纯化后作为靶分子用于12肽噬菌体展示库筛选.得到10个对nNOS具有特异性抑制作用的克隆,DNA测序显示一个氨基酸共同序列:KPHHHPMPPQVS,将其命名为NPI.合成的NPI多肽对从小鼠脑新鲜制备的nNOS具有抑制作用(抑制率为25%～35%),而对失去部分活性的nNOS却表现为剂量依赖的恢复活性效应.结果提出一种研发nNOS调节药物的新方法-噬菌体展示技术,同时NPI对nNOS活性的'双向调节功能也为认识机体自身nNOS活性的调控过程提供新的启示.
作 者：潘明阳 龚自力 徐洪 潘英 朱敏生 陈华群 PAN Ming-Yang GONG Zi-li XU Hong PAN Ying ZHU Min-sheng CHEN Hua-qun 作者单位：潘明阳,PAN Ming-Yang(江苏省分子生物医学重点实验室,南京师范大学生命科学院,南京,210097;华东医学生物技术研究所,南京,210002)龚自力,徐洪,潘英,GONG Zi-li,XU Hong,PAN Ying(华东医学生物技术研究所,南京,210002)
朱敏生,ZHU Min-sheng(南京大学模式动物研究所,南京,210061)
陈华群,CHEN Hua-qun(江苏省分子生物医学重点实验室,南京师范大学生命科学院,南京,210097)
刊 名：中国生物工程杂志 ISTIC PKU英文刊名：CHINA BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 26(5) 分类号：Q93 关键词：nNOS 噬菌体展示库 活性修饰篇8：噬菌体改组库的构建及高活性水蛭素变异体的筛选
噬菌体改组库的构建及高活性水蛭素变异体的筛选
目的: 运用DNA家族改组方法提高水蛭素的抗凝血酶活性.方法: 将水蛭素HV1、HV2、HV3基因等量混合, 用DNase I消化, 回收50 bp左右的`片段, 再经无引物和有引物PCR扩增获得与原基因大小相同的改组分子, 构建噬菌体展示的水蛭素改组文库, 经凝血酶亲和淘选, ELISA筛选高活性的水蛭素变异体.结果: 经过DNA改组和噬菌体亲和筛选, 成功获得抗凝血酶活性提高的水蛭素变异体HV2-N47K.结论: 用DNA家族改组及亲和淘选技术能够筛选出高活性的水蛭素变异体蛋白, 这为其他分子的改组提供了借鉴.
作 者：龙铟 刘家云 刘莉 王宗仁 LONG Yin LIU Jia-yun LIU Li WANG Zong-ren 作者单位：龙铟,王宗仁,LONG Yin,WANG Zong-ren(第四军医大学西京医院中医科,陕西,西安,710032)刘家云,LIU Jia-yun(第四军医大学西京医院检验科,陕西,西安,710032)
刘莉,LIU Li(第四军医大学药学系药理学教研室,陕西,西安,710032)
刊 名：细胞与分子免疫学杂志 ISTIC PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF CELLULAR AND MOLECULAR IMMUNOLOGY 年，卷(期)：2006 22(2) 分类号：Q81 关键词：水蛭素 DNA改组 亲和淘选篇9：乳酸杆菌的筛选及其S-层蛋白的初步研究
乳酸杆菌的筛选及其S-层蛋白的初步研究
采用SL选择性培养基,从鸡肠刮取物、酸辣椒和牛奶3种不同的分离源中.分离、纯化得到9株乳酸杆菌,经SDS-PAGE电泳对S-层蛋白定性分析发现,来源于辣椒的C7,C8和C9,牛奶的`M8,鸡肠道刮取物的I3和I7共6株乳酸杆菌有S-层蛋白表达.
作 者：肖荣 杨秀华 王远亮 李宗军 Xiao Rong Yang Xiuhua Wang Yuanliang Li Zongjun 作者单位：湖南农业大学,食品科学技术学院,湖南,长沙,410128 刊 名：农产品加工・学刊 英文刊名：ACADEMIC PERIODICAL OF FARM PRODUCTS PROCESSING 年，卷(期)：2008 “”(11) 分类号：Q819 关键词：乳酸杆菌 筛选 S-层蛋白★ 分子生物学课件
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