抗CD3/抗CD20双特异性单链抗体介导的B淋巴瘤细胞体外裂解作用

时间:2022-05-06 11:44:26 其他范文 收藏本文 下载本文

抗CD3/抗CD20双特异性单链抗体介导的B淋巴瘤细胞体外裂解作用((集锦4篇))由网友“小海”投稿提供,下面是小编给大家带来的抗CD3/抗CD20双特异性单链抗体介导的B淋巴瘤细胞体外裂解作用,以供大家参考,我们一起来看看吧!

抗CD3/抗CD20双特异性单链抗体介导的B淋巴瘤细胞体外裂解作用

篇1:抗CD3/抗CD20双特异性单链抗体介导的B淋巴瘤细胞体外裂解作用

抗CD3/抗CD20双特异性单链抗体介导的B淋巴瘤细胞体外裂解作用

在构建并成功表达抗CD3/抗CD20双特异性单链抗体(bscCD3×CD20)的基础上,对其在体外介导T淋巴细胞杀伤Ramous B淋巴瘤细胞的.生物活性进行了分析.Annexin V/PI(AV/PI)染色和形态学观察及扫描电镜分析表明bscCD3×CD20介导的B淋巴瘤细胞体外裂解作用是通过先诱导靶细胞凋亡而继发坏死、裂解的方式实现的.非放射性细胞毒性分析表明bscCD3×CD20介导的T淋巴细胞杀伤活性随抗体浓度、反应时间和效靶比的升高而增加.在抗体浓度为5μg/mL、作用时间为24h、效靶比为10:1时,杀伤活性最高可达87.3%.采用美国SuperArray人细胞凋亡芯片检测细胞杀伤起始阶段细胞凋亡相关基因的表达水平变化,许多凋亡相关基因的表达均发生了不同程度的上调或下调,其中ATM基因表达升高了187倍,p53基因升高了15倍,提示ATM-p53途径可能是bscCD3×CD20介导T细胞诱导B淋巴瘤细胞凋亡的主要途径.

作 者:于蕊 李世崇 吴本传 刘红 叶玲玲 刘兴茂 王启伟 陈昭烈 YU Rui LI Shi-Chong WU Ben-Chuan LIU Hong YE Ling-Ling LIU Xing-Mao WANG Qi-Wei CHEN Zhao-Lie  作者单位:军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071 刊 名:生物工程学报  ISTIC PKU英文刊名:CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY 年,卷(期): 22(3) 分类号:Q754 关键词:CD3   CD20   双特异性单链抗体   细胞裂解   B细胞淋巴瘤  

篇2:抗人精浆蛋白/抗CD3双特异性单链抗体的活性研究

抗人精浆蛋白/抗CD3双特异性单链抗体的活性研究

目的: 构建并表达抗人精浆蛋白/抗CD3的双特异性单链抗体(BsscFv),并检测其生物学活性.方法: 利用重叠延伸拼接PCR,拼接抗人精浆蛋白scFv基因和抗CD3 scFv基因,并在中间引入柔性短肽(GlySerGly)2,构建抗人精浆蛋白/抗CD3的BsscFv基因.测序正确后,将融合基因亚克隆入真核表达载体中,并在HeLa细胞中进行表达,采用流式细胞术(FCM)和 51Cr释放试验,评价BsscFv的抗原结合活性和体外介导的特异性杀伤靶细胞的效应,以及利用裸鼠前列腺癌模型观察其在体内的抑瘤作用.结果: 测序分析证实,BsscFv基因片段的大小为1.5 kb,编码500个氨基酸,该序列与设计的完全一致.SDS-PAGE和Western blot分析证明: 表达产物存在于HeLa细胞的培养上清中,其相对分子质量(Mr)为61 000.FCM结果显示: BsscFv可特异性的结合前列腺癌细胞LNCaP和CD3+淋巴瘤细胞Jurkat,结合率分别为54.1%和53.7%.体外实验表明,BsscFv可介导CTL对LNCaP细胞的杀伤.与对照组相比较,接种LNCaP的裸鼠在体内注射激活的.CTL和BsscFv治疗后,肿瘤的生长明显受到抑制(P<0.05).结论: 抗人精浆蛋白/抗CD3的BsscFv具有一定的生物学活性,在体内、体外均可介导CTL杀伤靶细胞LNCaP.

作 者:王栋 王禾 武国军 吴卫真 杨顺良 林文洪 谭建明 WANG Dong WANG He WU Guo-jun WU Wei-zhen YANG Shun-liang LIN Wen-hong TAN Jian-ming  作者单位:王栋,吴卫真,杨顺良,林文洪,谭建明,WANG Dong,WU Wei-zhen,YANG Shun-liang,LIN Wen-hong,TAN Jian-ming(南京军区福州总医院泌尿外科,福建,福州,350025)

王禾,武国军,WANG He,WU Guo-jun(第四军医大学西京医院泌尿外科,陕西,西安,710032)

刊 名:细胞与分子免疫学杂志  ISTIC PKU英文刊名:CHINESE JOURNAL OF CELLULAR AND MOLECULAR IMMUNOLOGY 年,卷(期):2006 22(4) 分类号:Q789 关键词:前列腺肿瘤   CD3   单链抗体   双特异性抗体  

篇3:抗HBsAg单链抗体特异性单克隆抗体的制备及应用

抗HBsAg单链抗体特异性单克隆抗体的制备及应用

目的 获得抗HBsAg单链抗体 (HBScFv)的单克隆抗体,并初步研究其在抗HBsAg类小分子抗体及其融合蛋白质的纯化、活性鉴定方面的应用.方法 利用杂交瘤技术,以大肠杆菌表达的重组抗HBScFv为抗原,免疫Balb/c小鼠,再将小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行细胞融合.通过ELISA法、Western-blot鉴定特异性单克隆抗体,通过免疫双扩散法鉴定单抗亚型,并将筛选到的高效价单抗用于抗HBsAg Fab抗体等重组蛋白质的亲和色谱及ELISA鉴定.结果 建立了9株能够稳定分泌抗HBScFv特异性单克隆抗体的'细胞株,其细胞上清效价为1:160~1:12 800,腹水效价为1:50 000~1:400 000;单克隆抗体的亚类分析结果显示有6株为IgG1,其余3株为IgG2a.初步应用结果 表明制备的单克隆抗体14F7可用于抗HBsAg Fab抗体等重组蛋白质的亲和色谱及活性鉴定.结论 成功建立了能够稳定分泌HBScFv特异性单克隆抗体的细胞株.

作 者:陈文吟 饶桂荣 任向荣 郑业华 粟宽源 CHEN Wen-yin RAO Gui-rong REN Xiang-rong ZHENG Ye-hua SU Kuan-yuan  作者单位:空军广州医院,肝病研究所,广东,广州,510602 刊 名:中国生化药物杂志  ISTIC PKU英文刊名:CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMICAL PHARMACEUTICS 年,卷(期): 27(5) 分类号:Q785 关键词:抗HBsAg单链抗体   单克隆抗体   制备  

篇4:抗人CD3改形单链抗体的构建、表达及活性测定

抗人CD3改形单链抗体的构建、表达及活性测定

CD3单抗通过多种途径有效地影响机体的免疫状态,在临床应用中具有极大的潜力.为克服鼠源单抗用于临床的局限性,拟采用抗体工程技术研制抗人CD3改形单链抗体.首先,将鼠源CD3单抗OKT3轻重链CDRs分别移植到人源抗体LS1轻链和Nd重链的框架中,经计算机模拟其空间构象,进行残基替换,确定CD3改形VL、VH氨基酸序列,化学合成改形VL、VH基因,将其分别插入至载体pROH80中,构建成抗人CD3改形单链抗体(scFv)基因.再将scFv基因克隆至构建的.表达载体pALM中诱导表达,产物主要为包涵体.对包涵体进行变性和复性,用IMAC法纯化,FACS法测定CD3改形scFv与抗原的结合活性,显示其竞争抑制率为18%.

作 者:蒋欣 俞小淙 刘喜富 张卫国 黄浩F 林晴 孙健 陈润生 黄华梁  作者单位:蒋欣,俞小淙,刘喜富,张卫国,黄浩F,林晴,黄华梁(中国科学院遗传研究所,北京,100101)

孙健,陈润生(中国科学院生物物理研究所,北京,100101)

刊 名:遗传学报  ISTIC SCI PKU英文刊名:ACTA GENETICA SINICA 年,卷(期):2000 27(9) 分类号:Q78 关键词:CD3   改形抗体   表达载体   构建   表达  

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