P21对DNA聚合酶δ表达的抑制及其对MCF7细胞增殖和恶性表型的影响

时间:2022-05-06 22:05:30 其他范文 收藏本文 下载本文

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P21对DNA聚合酶δ表达的抑制及其对MCF7细胞增殖和恶性表型的影响

篇1:P21对DNA聚合酶δ表达的抑制及其对MCF7细胞增殖和恶性表型的影响

P21对DNA聚合酶δ表达的抑制及其对MCF7细胞增殖和恶性表型的影响

细胞周期抑制因子p21能影响G1/S期转换和G2/M期进程,进而抑制细胞增殖.p21表达增高可以抑制多个DNA复制相关基因表达.DNA聚合酶δ是DNA复制中最为重要的复制酶,p21是否抑制它的表达,并通过这种作用影响细胞增殖及细胞恶性表型的变化,至今还没有报道.本研究观察到p21表达增强的'MCF7-p21细胞生长速率变慢,血清依赖性增强,细胞的锚定和非锚定依赖性增殖都受到抑制,表明p21表达增加对细胞增殖和细胞恶性表型的产生有重要作用.而Western blot检测发现在p21表达增高的MCF7-p21细胞中,聚合酶δ(p125亚基)表达下降.p21高表达抑制POLD1启动子活性,这种抑制作用具有p21剂量依赖效应.这表明p21表达增高对细胞增殖的抑制和细胞恶性表型的影响可能是通过抑制在DNA复制中最重要的聚合酶δ(p125)的表达来实现的.这可能是p21对细胞增殖及恶性表型影响的一个新的调控机制.

作 者:石磊 徐恒 朱晓宇 孙建华 宋楠萌 李莉 桑建利  作者单位:石磊,朱晓宇,孙建华,宋楠萌,李莉,桑建利(北京师范大学教育部细胞增殖与调控重点实验室,北京,100875)

徐恒(Emory University School of Medicine,GA 30332,USA)

刊 名:自然科学进展  ISTIC PKU英文刊名:PROGRESS IN NATURAL SCIENCE 年,卷(期): 16(6) 分类号:Q95 关键词:MCF7   p21   细胞增殖   DNA聚合酶δ   p125亚基  

篇2:重组逆转录病毒双表达载体的构建及其对K562细胞增殖活性的影响

重组逆转录病毒双表达载体的构建及其对K562细胞增殖活性的影响

目的 构建针对慢性粒细胞白血病bcr-abl b3a2型mRNA的双表达逆转录病毒载体,初步探讨其对K562细胞表型的影响.方法 以逆转录病毒载体pMSCV-neo为骨架,构建eGFP及针对bcr-abl b3a2型mRNA的反义RNA双表达载体pMSCV/GFP-H1-BCR/ABL40AS,同时构建对照载体pMSCV/GFP-H1-BCR/ABL40S和pMSCV/GFP-H1-BCR/ABL80AS,酶切及测序鉴定各重组载体;以脂质体法转染各载体到PT67包装细胞后,G418筛选稳定的病毒产生细胞株,再以NIH3T3细胞测定病毒滴度并感染K562细胞,计数细胞数绘制细胞生长曲线,FCM检测细胞凋亡情况、并用Western blot检测PKR激活情况.结果 酶切及测序结果证实各重组载体构建完全正确;G418筛选到高滴度重组逆转录病毒生产细胞株:PT67-MSCV/GFP、PT67-40as、PT67-40s和PT67-80as,且PT67-40as上清感染组K562细胞生长受抑制,其24 h时早期细胞凋亡率为22.54±3.19%,与除PT67-80as组外的其余各组相比有显著差异(P<0.05);PT67-40as和PT67-80as处理组细胞PKR磷酸化水平分别增高了59.20%和60.33%,2AP能抑制PT67-40as的`作用.结论 成功构建重组逆转录病毒双表达载体,并发现其能抑制K562细胞生长并引起细胞凋亡,通过激活PKR抗肿瘤可望成为肿瘤新的靶向治疗策略.

作 者:曾建明 冯文莉 王小中 赵世巧 白卫君 罗云萍 温健萍 涂植光 黄宗干 ZENG Jian-ming FENG Wen-li WANG Xiao-zhong ZHAO Shi-qiao BAI Wei-jun LUO Yun-ping WEN Jian-ping TU Zhi-guang HUANG Zong-gan  作者单位:曾建明,冯文莉,王小中,赵世巧,白卫君,罗云萍,ZENG Jian-ming,FENG Wen-li,WANG Xiao-zhong,ZHAO Shi-qiao,BAI Wei-jun,LUO Yun-ping(重庆医科大学临床血液学教研室,临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,重庆,400016)

温健萍,WEN Jian-ping(Canadian Blood Services,Hamilton,ON L8S 1H8 Canada)

涂植光,TU Zhi-guang(重庆医科大学临床生物化学教研室,重庆,400016)

黄宗干,HUANG Zong-gan(重庆医科大学临床学院血液科,重庆,400016)

刊 名:第三军医大学学报  ISTIC PKU英文刊名:ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE 年,卷(期):2006 28(21) 分类号:Q782 R329.28 R733.722 关键词:慢性粒细胞白血病   PKR   反义RNA   逆转录病毒载体   基因克隆  

篇3:SMAF1基因的异位过表达对脂肪细胞3T3-L1增殖和凋亡的影响

SMAF1基因的异位过表达对脂肪细胞3T3-L1增殖和凋亡的影响

目的 观察一脂肪细胞特异性表达的新基因小脂肪细胞因子1(SMAF1)在小鼠脂肪前体细胞3T3-L1中的异位表达对脂肪细胞增殖和凋亡的影响.方法 构建小鼠SMAF1真核表达载体并稳定转染3T3-L1脂肪前体细胞以获得永久异位表达SMAF1基因的细胞株,使用Western blot证实SMAF1基因的'表达.体外培养SMAF13T3-L1脂肪细胞,以MTT法检测SMAF13T3-L1脂肪细胞的增殖;用流式细胞仪对SMAF13T3-L1脂肪细胞进行凋亡分析.结果 与对照相比,SMAF13T3-L1脂肪细胞增殖明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);而SMAF13T3-L1脂肪细胞凋亡分析结果与对照无显著性差异. 结论 SMAF1基因在3T3-L1中的异位性表达,对3T3-L1前体脂肪细胞生长增殖有显著的抑制作用,而对细胞凋亡无影响,提示SMAF1在脂肪细胞增殖分化中发挥一定的作用.

作 者:韩威 段佳慧 吴民泸 林泽超 刘彦华 HAN Wei DUAN Jia-hui WU Min-lu LIN Ze-chao LIU Yan-hua  作者单位:成都医学院医学检验系实验中心,成都,610083 刊 名:成都医学院学报 英文刊名:JOURNAL OF CHENGDU MEDICAL COLLEGE 年,卷(期): 4(3) 分类号:Q344.13 关键词:SMAF1   脂肪细胞   异位表达   增殖   凋亡  

篇4:维甲酸受体β基因RNAi表达质粒的构建及其对A549细胞增殖和分化的影响

维甲酸受体β基因RNAi表达质粒的构建及其对A549细胞增殖和分化的影响

目的:利用RNA干扰(RNAi)技术,构建针对维甲酸受体(RAR)β基因的小干扰RNA(siRNA)表达质粒,诱导RARβ基因沉默,并观察其对肺癌细胞A549株的细胞周期和增殖的影响.方法:依据设计siRNA的原则,针对人RARβ的mRNA序列,设计并合成编码siRNA的.2条寡核苷酸序列,经退火成互补双链,再克隆到pSUPER-NEO-GFP真核表达载体中构建重组体pSUPER-RARβ,转染至A549细胞中,以空质粒和RARβ高表达质粒转染为对照,用Western印迹检测RARβ基因的表达,并采用MTT试验检测转染后细胞株的增殖和细胞分化情况.结果:表达人类RARβ基因的siRNA重组表达质粒构建成功;MTT试验结果表明,转染的A549-RARβ-si细胞增殖能力降低.结论:采用RNAi技术特异阻断RARβ基因表达,通过转染A549细胞,可使其细胞形态发生变化,并抑制其细胞生长.

作 者:林婵 王力 边六交 LIN Chan WANG Li BIAN Liu-Jiao  作者单位:林婵,边六交,LIN Chan,BIAN Liu-Jiao(西北大学,基因工程中心,陕西,西安,710069)

王力,WANG Li(中国科学院,上海生命科学院研发中心,上海,33)

刊 名:生物技术通讯  ISTIC英文刊名:LETTERS IN BIOTECHNOLOGY 年,卷(期): 19(3) 分类号:Q78 Q25 关键词:维甲酸受体β   RNA干扰   A549细胞   基因表达抑制  

篇5:三七总皂甙对血管平滑肌细胞增殖及c-myc基因表达的影响

三七总皂甙对血管平滑肌细胞增殖及c-myc基因表达的影响

目的 探讨三七总皂甙对血小板源生长因子刺激的血管平滑肌细胞增殖的影响及其可能机制.方法 运用血小板源生长因子刺激兔体外血管平滑肌细胞增殖模型,通过四甲基偶氮唑盐比色法、流式细胞术及免疫细胞化学法观察三七总皂甙对其增殖活性、细胞周期及c-myc蛋白表达的影响.结果 血小板源生长因子显著刺激血管平滑肌细胞增殖,三七总皂甙呈浓度依赖性抑制血管平滑肌细胞增殖,对血小板源生长因子诱导的血管平滑肌细胞增殖亦具有显著抑制作用;三七总皂甙作用下血管平滑肌细胞处于G1/G0期的细胞数增多,而G2/S期的.细胞数显著减少,c-myc蛋白的表达亦降低.结论 三七总皂甙对基础状态下及血小板源生长因子诱导的血管平滑肌细胞增殖均具有显著抑制作用,部分机制与其阻滞血管平滑肌细胞G1/G0期向S期转化以及下调c-myc基因表达有关.

作 者:周永兰 陈清枝 张延斌 李东野 ZHOU Yong-Lan CHEN Qing-Zhi ZHANG Yan-Bin LI Dong-Ye  作者单位:周永兰,ZHOU Yong-Lan(江苏大学附属徐州医院,徐州市第三人民医院心内科,江苏省徐州市,221005)

陈清枝,张延斌,李东野,CHEN Qing-Zhi,ZHANG Yan-Bin,LI Dong-Ye(徐州医学院附属医院心内科,江苏省徐州市,221002)

刊 名:中国动脉硬化杂志  ISTIC PKU英文刊名:CHINESE JOURNAL OF ARTERIOSCLEROSIS 年,卷(期): 14(8) 分类号:Q7 关键词:分子生物学   三七总皂甙的药理作用   四甲基偶氮唑盐比色法和细胞免疫组织化学   三七总皂甙   血管平滑肌细胞   血小板源生长因子   c-myc蛋白  

篇6:蛇毒NGF对PC12细胞MAPK表达的影响

蛇毒NGF对PC12细胞MAPK表达的影响

有丝分裂原激活的蛋白激酶(MAPK)是磷酸化瀑布中涉及的一类重要蛋白激酶.阐明各种胞外因素对MAPK的调节,以及各种外界信息所经历的'具体过程是摆在研究者面前的挑战性任务.用含有长白白眉蝮蛇(A.halys)蛇毒神经生长因子(NGF)的培养基培养PC12细胞, 观察MAPK和MAPK激酶(MAPKK)表达及MAPK的活性.结果表明,A.halys蛇毒NGF使PC12细胞的MAPK和MAPKK的表达及MAPK活性明显增加.当蛇毒NGF浓度在25~100 μg/L时,随浓度的增加,酶的表达和活性呈线性增加.由A.halys蛇毒NGF诱导的MAPK和MAPKK表达的增加依赖于蛋白激酶C(PKC).

作 者:秦丽雅 刘玉欣 张蕾 宋伶俐 崔肇春 QIN Li-Ya LIU Yu-Xin ZHANG Lei SONG Ling-Li CUI Zhao-Chun  作者单位:秦丽雅,刘玉欣,张蕾,宋伶俐,QIN Li-Ya,LIU Yu-Xin,ZHANG Lei,SONG Ling-Li(大连市医药科学研究所,大连,116013)

崔肇春,CUI Zhao-Chun(大连医科大学生物化学教研室,大连,116027)

刊 名:生物化学与生物物理进展  ISTIC SCI PKU英文刊名:PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS 年,卷(期): 27(3) 分类号:Q78 关键词:有丝分裂原激活的蛋白激酶   神经生长因子   长白白眉蝮蛇   蛇毒   PC12细胞  

篇7:利凡诺对不同胚层来源细胞增殖能力的影响

利凡诺对不同胚层来源细胞增殖能力的影响

目的:观察利凡诺对来源于不同胚层的细胞生长和增殖能力的影响.方法:运用形态学观察法观察细胞在经不同浓度利凡诺(3.13、6.25、12.5 μg・ml-1)作用不同时间(24、48、72 h)后形态学的改变,同时在荧光显微镜下观察细胞中利凡诺的.荧光强度.用噻唑蓝(MTT)法以及核仁组织区银染法(AgNOR)检测利凡诺作用后各细胞增殖能力的改变.结果:利凡诺作用24 h后,肝细胞(BRL-3A)及成纤维细胞(L929)的形态无明显变化,人脐静脉内皮细胞(HuVEC)突起变细甚至消失,细胞生长速度变慢;伴随药物浓度的增大,单位面积细胞数逐渐减少;3种细胞内利凡诺自发荧光随着药物浓度增大和时间延长而增强.MTT结果显示利凡诺对3种细胞的增殖都有一定的抑制作用,其中对HuVEC细胞增值能力的抑制强于另外两种细胞(均P<0.01).在不同浓度利凡诺作用下,HuVEC核仁组织区减少幅度较另外两种细胞更加明显,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论:利凡诺对来源不同胚层的3种细胞的增殖能力均有抑制作用,其中对HuVEC的抑制尤其显著,提示该药对内皮细胞生长增殖的抑制较为特异.

作 者:罗昊 陈平圣 LUO Hao CHEN Ping-sheng  作者单位:东南大学基础医学院,病理学与病理生理学系,江苏,南京,210009 刊 名:东南大学学报(医学版)  ISTIC英文刊名:JOURNAL OF SOUTHEAST UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION) 年,卷(期): 29(2) 分类号:Q253 关键词:利凡诺   人脐静脉内皮细胞   肝细胞   成纤维细胞  

篇8:黄芩素对猪前体脂肪细胞增殖分化的影响

黄芩素对猪前体脂肪细胞增殖分化的影响

研究黄芩素(BAI)对猪前体脂肪细胞增殖分化的影响,并探讨其可能的.作用机制.原代培养猪前体脂肪细胞,采用油红O染色观察细胞分化的形态学变化;MTT检测细胞增殖状况;油红O染色提取定量分析细胞内脂肪生成及细胞分化程度;分光光度法测定脂肪酸合酶(FAS)的活性;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测分化特异基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ2(PPARγ2)mRNA表达变化.结果显示,前体脂肪细胞在分化成脂肪细胞的过程中,其形态由梭形变成椭圆形、圆形,细胞内充满大小不一的脂滴;BAI浓度在160~640μmol/L时显著抑制其增殖(P<0.05)、BAI浓度为40~320μmol/L时显著抑制PPARγ2 mRNA表达和FAS的活性,并抑制细胞分化(P<0.05).以上结果说明,BAI对前体脂肪细胞增殖分化均有一定抑制作用,BAI可能通过抑制PPARγ2 mRNA表达和降低FAS活性,从而抑制猪前体脂肪细胞分化.

作 者:卢荣华 李影 张立杰 杨公社 LU Rong-Hua LI Ying ZHANG Li-Jie YANG Gong-She  作者单位:西北农林科技大学动物脂肪沉积与肌肉发育实验室,杨凌,712100 刊 名:生物工程学报  ISTIC PKU英文刊名:CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY 年,卷(期): 22(6) 分类号:Q253 关键词:黄芩素   猪   前体脂肪细胞   增殖   分化  

篇9:环巴胺对胃癌细胞BGC-823增殖凋亡及Shh、Gli-1基因表达的影响

环巴胺对胃癌细胞BGC-823增殖凋亡及Shh、Gli-1基因表达的影响

目的:探讨环巴胺对胃癌细胞BGC-823增殖凋亡及Shh、Gli-1基因表达的影响.方法:采用MTT法检测环巴胺对BGC-823细胞的生长抑制效应,倒置显微镜及AO/EB荧光显微镜观察细胞凋亡的形态学改变,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR检测Shh、Gli-1 mRNA的表达情况.结果:环巴胺可明显抑制BGC-823细胞的`生长,呈时间剂量依赖性,并出现典型的细胞形态学改变;经32、64、96μmol ・L-1的环巴胺作用24h后的凋亡率依次为12.50%、31.50%、 56.10%,明显高于空白对照组的2.10% (均P<0.01);Shh及Gli-1 mRNA均表达,环巴胺可下调Gli-1 mRNA表达,但对Shh mRNA表达无明显影响.结论:环巴胺可以抑制胃癌细胞BGC-823增殖并诱导细胞凋亡,其机制可能与下调Gli-1基因表达有关.

作 者:任雪萍 姜藻 刘飞 顾晓怡 高峰 REN Xue-ping JIANG Zao LIU Fei GU Xiao-yi GAO Feng  作者单位:东南大学附属中大医院,肿瘤中心,江苏,南京,210009 刊 名:东南大学学报(医学版)  ISTIC英文刊名:JOURNAL OF SOUTHEAST UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION) 年,卷(期): 27(3) 分类号:Q253 Q255 Q786 R735.2 关键词:环巴胺   胃癌细胞   细胞凋亡   Shh   Gli-1   基因表达  

篇10:汉防己对胸腺细胞Fas和Fas-L表达的影响

汉防己对胸腺细胞Fas和Fas-L表达的影响

目的 探讨防己(Radix Stephaniae Tetrandrae)对小鼠胸腺的细胞的`影响及其作用机制.材料与方法取昆明小鼠的胸腺细胞,随机分为阴性实验组(无防己)、阴性对照组(用0.05 M PBS代替一抗)和3个药物实验组(其浓度分别为10 μg/ml、50 μg/ml、100 μg/ml),分别培养1 h、6 h、12 h、24 h后,利用免疫细胞化学的方法检测细胞内Fas和Fas-L的阳性细胞的表达.结果 随着汉防己煎剂浓度的增高及作用时间的延长,实验组Fas和Fas-L的阳性细胞表达率显著增高(P<0.05).结论 防己可以诱导小鼠胸腺的细胞的凋亡.

作 者:陈英杰 陈元晓 廖文云 李必俊 周轶平Chen Ying-jie Chen Yuan-xiao Liao Wen-yun Li Bi-jun Zhou Yi-ping  作者单位:陈英杰,李必俊,Chen Ying-jie,Li Bi-jun(昆明医学院解剖教研室)

陈元晓,Chen Yuan-xiao(昆明医学院生物学教研室)

廖文云,Liao Wen-yun(云南省第一人民医院急诊科,云南昆明,650011)

周轶平,Zhou Yi-ping(昆明医学院天然药物重点实验室,云南昆明,650031)

刊 名:四川解剖学杂志 英文刊名:SICHUAN JOURNAL OF ANATOMY 年,卷(期):2009 17(1) 分类号:Q282 关键词:胸腺细胞   凋亡   汉防己煎剂   免疫细胞化学方法  

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