牙鲆碱性磷酸酶基因5调控区的克隆及其功能检测（整理6篇）由网友“太阳西边出发”投稿提供，下面是小编整理过的牙鲆碱性磷酸酶基因5调控区的克隆及其功能检测，欢迎大家阅读分享借鉴，希望对大家有所帮助。
篇1：牙鲆碱性磷酸酶基因5调控区的克隆及其功能检测
牙鲆碱性磷酸酶基因5调控区的克隆及其功能检测
通过基因组步移的方法扩增出一段924bp的牙鲆碱性磷酸酶基因5'调控区序列,在线软件分析表明5'调控区内可能含有GKLF、Oct、CREB、E2F、CEBP、GATA-1、Pitx-1、Pit-、RARE/TRE、AP4等转录因子结合位点.采用DNA重组的方法,将克隆得到的5'调控区片段插入启动子缺失的增强型绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-1中,构建重组表达载体pEGFP-JFALP.重组载体瞬时转染COS-7细胞,在倒置荧光显微镜下可以检测到绿色荧光信号,且荧光信号随着时间的`延长而增强.结果 表明本实验克隆的牙鲆碱性磷酸酶基因5'调控区具有一定的启动子活性,为今后进一步研究碱性磷酸酶基因表达调控的分子机制奠定基础.
作 者：施志仪 顾一峰 陈晓武 胡燕林 Shi Zhiyi Gu Yifeng Chen Xiaowu Hu Yanlin 作者单位：上海水产大学生物技术研究中心,上海,90 刊 名：生物技术通报 PKU英文刊名：BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年，卷(期)： “”(2) 分类号：Q95 关键词：碱性磷酸酶 基因 5'调控区 克隆 功能篇2：人FXR基因5调控区功能分析
人FXR基因5调控区功能分析
为研究人法尼酯衍生物X受体(FXR)基因5'调控区的功能,在对人FXR基因进行生物信息学分析的`基础上,用5'RACE法确定该基因的转录起始位点碱基是A.采用PCR技术,扩增人基因组DNA中FXR基因5'上游序列,构建了5种含不同长度启动子序列的荧光素酶报告基因表达体系.将它们瞬时转染HepG2细胞,检测其荧光素酶活性.结果表明,-1 651～+200、-1 496～+200区域的启动子活性无明显区别,-847～+200区域的启动子活性最高,-544～+200区域启动子活性较前显著降低.研究提示,FXR基因转录所必需的基因启动子序列在-847～-544范围内.
作 者：娄桂予 陈敏 李渝萍 李强 陈彬 陈健 廖荣霞 周度金 LOU Gui-Yu CHEN Min LI Yu-Ping LI Qiang CHEN Bin CHEN Jian Liao Rong-Xia ZHOU Du-Jin 作者单位：第三军医大学生物化学与分子生物学教研室,重庆,400038 刊 名：中国生物化学与分子生物学报 ISTIC PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY 年，卷(期)： 22(4) 分类号：Q78 关键词：法尼酯衍生物X受体 启动子 转录调控篇3：奶山羊β-乳球蛋白基因5、3调控区的克隆和序列分析
奶山羊β-乳球蛋白基因5、3调控区的克隆和序列分析
目的:克隆奶山羊β-乳球蛋白(BLG)基因5'、3'调控区,并对其进行序列分析.方法:从徐淮奶山羊组织中提取基因组DNA,采用高保真长模板PCR法克隆得到奶山羊BLG基因4.2 kb的5'调控区和1.8 kb的3'调控区;将纯化后的PCR产物克隆到pGEM-T Easy载体中,经酶切鉴定和序列测定验证克隆的正确性.结果:部分序列分析表明,奶山羊BLG基因5'区与GenBank中登录的山羊和绵羊BLG基因5'区的同源性分别为100%和95%,3'区的同源性分别为99%和93%;克隆得到的.奶山羊BLG基因调控区与山羊BLG伪基因显著不同,二者5'区和3'区的同源性分别为83%和88%.结论:克隆得到的奶山羊BLG基因调控区可用于构建乳腺特异性表达载体,用于外源基因在转基因动物乳腺中的高效表达.
作 者：周咏松 成勇 殷烈 徐冬兰 柏亚军 郭磊 袁玉国 ZHOU Yong-Song CHENG Yong YIN Lie XU Dong-Lan BAI Ya-Jun GUO Lei YUAN Yu-Guo 作者单位：扬州大学,兽医学院,江苏省转基因动物制药工程研究中心,江苏,扬州,225009 刊 名：生物技术通讯 ISTIC英文刊名：LETTERS IN BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 19(4) 分类号：Q78 关键词：奶山羊 β-乳球蛋白 基因克隆 DNA序列分析篇4：鹅IGF-Ⅰ基因5调控区单核苷酸多态性分析
鹅IGF-Ⅰ基因5调控区单核苷酸多态性分析
以皖西白鹅和朗德鹅为素材,设计引物对鹅的`IGF-Ⅰ基因5'端非编码区序列克隆测序,运用PCR-SSCP方法检测IGF-Ⅰ基因5'调控区的单核苷酸多态性.检测发现该区域存在4个SNP位点,分别是:A-26T、A-215G、A-314G、A-325T.
作 者：杜晓东 张绍胜 姜润深 夏生林 耿照玉 袁绍友 作者单位：杜晓东,张绍胜,姜润深,耿照玉(安徽农业大学动物科技学院,安徽,合肥,230036)夏生林(安徽省芜湖市动物疾控中心,安徽,芜湖,241000)
袁绍友(安徽省皖西白,鹅原种场,安徽,六安,237005)
刊 名：畜牧与饲料科学 英文刊名：ANIMAL HUSBANDRY AND FEED SCIENCE 年，卷(期)： 30(2) 分类号：Q78 关键词：鹅 IGF-Ⅰ基因 PCR-SSCP 单核苷酸多态性 调控区篇5：GUS基因瞬时表达检测香菇顺式因子的调控功能
GUS基因瞬时表达检测香菇顺式因子的调控功能
设计了一个顺式元件功能检测载体pYF3553,该载体以GUS为报告基因,其上游连接一段由待测香菇(Lentinula edodes)克隆片段与酵母Cyc1基本启动子组成的杂合启动子.将编号为XG108和XG111的香菇克隆序列构建的检测载体命名为pXG108、pXG111.将pXG108转化到香菇原生质体中,结果被测样的GUS瞬时活性比对照增加一倍,表明GUS基因得到了表达,其上游调控元件具有调控功能.对比pXG108和pXG111转化后的.表达结果,其GUS瞬时表达活性表现出差异,这种差异与克隆片段在酵母中的表达差异相一致.分析了利用GUS瞬时表达验证未知香菇顺式元件的优缺点.
作 者：胡乐琴 姚泉洪 陈明杰 熊爱生 潘迎捷 HU Le-qin YAO Quan-hong CHEN Ming-jie XIONG Ai-sheng PAN Ying-jie 作者单位：胡乐琴,HU Le-qin(上海水产大学生命科学与技术学院,上海,90)姚泉洪,熊爱生,YAO Quan-hong,XIONG Ai-sheng(上海农业科学研究院生物中心,上海,06)
陈明杰,CHEN Ming-jie(上海农业科学研究院食用菌研究所,上海,201106)
潘迎捷,PAN Ying-jie(上海水产大学食品学院,上海,200090)
刊 名：上海水产大学学报 ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF SHANGHAI FISHERIES UNIVERSITY 年，卷(期)： 15(3) 分类号：Q939.96 关键词：香菇 顺式调控元件 转化 GUS基因 瞬时表达篇6：扬州鹅PRL基因5调控区SNP检测及其与产蛋性状的相关分析
扬州鹅PRL基因5调控区SNP检测及其与产蛋性状的相关分析
催乳素(Prolactin,PRL)是影响禽类就巢性和产蛋性能的重要候选基因,本试验以扬州鹅为研究素材,采用PCR-SSCP方法检测催乳素基因5'调控区序列的SNP位点并分析其与扬州鹩产蛋性状的相关性,以期为扬州鹅产蛋性状标记的辅助选择提供一定的理论依据.结果表明,在试验群体中检测到CC、DD两种基因型,未检测到CD型;对不同基因型个体测序分析发现,在外显子1上游+11处发现了一个G→T突变;等位基因C和D的频率分别为0.7692和0.2308.供试群体在5'调控区检测位点上处于Hardy-Weinberg不平衡状态.PRL基因5'调控区的碱基突变对扬州鹅的'产蛋量和开产日龄有极显著的影响,CC型群体在一个产蛋周期内的平均产蛋量极显著高于DD型(P<0.01);开产日龄也是CC型极显著早于DD型(P<0.01).
作 者：张高娜 杨海明 王志跃 韩厚明 张康宁 作者单位：张高娜,杨海明,王志跃(扬州大学动物科学与技术学院,江苏扬州,225009)韩厚明,张康宁(常州市立华畜禽有限公司,江苏常州,213168)
刊 名：中国家禽 PKU英文刊名：CHINA POULTRY 年，卷(期)：2010 32(6) 分类号： 关键词：扬州鹅 PRL基因 PCR-SSCP SNP 产蛋性状★ 基因工程论文
★ 动物细胞培养
★ 恶性疟原虫PfRNaseⅡ的克隆表达与降解特性的性状分析论文
★ 分子生物学课件
★ 遗传学试题
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