硫酸软骨素肽的分离纯化和鉴定

时间:2022-11-30 07:41:42 其他范文 收藏本文 下载本文

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硫酸软骨素肽的分离纯化和鉴定

篇1:硫酸软骨素肽的分离纯化和鉴定

硫酸软骨素肽的分离纯化和鉴定

本文直接用木瓜蛋白酶提取软骨硫酸软骨素肽,采用表面活性剂和三氯乙酸除蛋白质,乙醇沉淀多糖,透析,DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析,从软骨中分离得到多糖肽,经红外光谱和琼脂糖电泳证明主要成分为硫酸软骨素肽,高效液相色谱和琼脂糖电泳证明该产品均一,纯度达到99.09%,相对分子量为75174Da,氨基酸平衡,呈味氨基酸较多.

作 者:熊双丽 金征宇 XIONG Shuang-li JIN Zheng-yu  作者单位:江南大学食品科学技术学院,江苏,无锡,214036 刊 名:食品科学  ISTIC PKU英文刊名:FOOD SCIENCE 年,卷(期): 27(4) 分类号:Q514.3 关键词:硫酸软骨素肽   分离纯化   鉴定  

篇2:重组hepcidin的分离纯化及鉴定

重组hepcidin的分离纯化及鉴定

建立了重组hepcidin的分离纯化方法,并鉴定其抗菌活性.经金属螯合初步纯化的重组蛋白在cysteine/cystine氧化还原体系中氧化形成二硫键,用变性条件下的'凝胶过滤除去多聚体,稀释复性后用于肠激酶酶切反应,得到重组hepcidin.融合蛋白His-hepcidin经氧化、复性后的总收率为50%,纯度大于95%.酶切后所得重组hepcidin经抑菌圈试验检验,对枯草芽孢杆菌具有抗菌活性.LC-ESI-MS与园二色光谱检测显示重组hepcidin与天然hepcidin相对分子质量相同、二级结构相似.

作 者:朱亚平袁其朋 张怀 ZHU Ya-Ping YUAN Qi-Peng ZHANG Huai  作者单位:朱亚平,袁其朋,ZHU Ya-Ping,YUAN Qi-Peng(北京化工大学制药工程系,北京,100029)

张怀,ZHANG Huai(北京科技大学生物科学与技术系,北京,100083)

刊 名:微生物学通报  ISTIC PKU英文刊名:MICROBIOLOGY 年,卷(期):2006 33(4) 分类号:Q789 关键词:重组hepcidin   二硫键   复性   纯化  

篇3:结缔组织生长因子特异性结合肽的表达及分离纯化

结缔组织生长因子特异性结合肽的表达及分离纯化

目的:利用基因工程技术获得与结缔组织生长因子(CTGF)特异性结合的小肽.方法:设计并合成带有肠激酶切割位点的基因片段,插入pET-32(a)+质粒载体中硫氧化还原蛋白基因下游,构建重组质粒,转入E.coli BL21表达菌中,用终浓度1mmol・L-1的IPTG诱导表达融合蛋白;用热变性和硫酸铵分级沉淀对融合蛋白进行初步纯化,然后用亲和层析进一步纯化,经肠激酶切割,最后用凝胶过滤层析分离获得目的小肽;用反相色谱对所获小肽进行纯度鉴定.结果:所构建的重组质粒测序结果与预期一致;诱导表达后用SDS-PAGE鉴定,发现在相对分子质量20 000处有浓密的.表达条带出现,与预期一致;融合蛋白用热变性和硫酸铵分级沉淀进行初步纯化,得率分别为78.6%和52.3%;用亲和层析纯化得率为50.5%;经肠激酶切割后用凝胶过滤层析分离获得目的小肽,用反相色谱鉴定其纯度大于95%;最终每升发酵液获得3.4mg目的肽.结论:成功制备CTGF特异性结合肽,为进一步研究该小肽的生物学活性打下基础.

作 者:王明虹 吴国球 刘乃丰 WANG Ming-hong WU Guo-qiu LIU Nai-feng  作者单位:王明虹,刘乃丰,WANG Ming-hong,LIU Nai-feng(东南大学,临床医学院,江苏,南京,210009)

吴国球,WU Guo-qiu(东南大学附属中大医院,临床检验中心,江苏,南京,210009)

刊 名:东南大学学报(医学版)  ISTIC英文刊名:JOURNAL OF SOUTHEAST UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION) 年,卷(期): 27(4) 分类号:Q78 关键词:结缔组织生长因子   分离纯化   特异性肽  

篇4:玉米源活性肽的分离纯化及清除DPPH自由基的活性

玉米源活性肽的分离纯化及清除DPPH自由基的活性

以脱脂醇溶蛋白为底物进行酶水解反应,获得了玉米源活性肽组分,经葡聚糖凝胶和离子交换等方法对产物进一步分离纯化. 以α-生育酚为阳性对照,研究了活性肽及其分离纯化组分对2,2-二苯基-1-苦基苯肼(DPPH)自由基的清除活性及其浓度的关系. 结果表明: 活性肽及其分离纯化组分均具有清除DPPH自由基的'活性;经CM-纤维素弱阳离子交换层析分离所得组分2对DPPH自由基的清除活性最强,且清除效果与其浓度及作用时间呈正相关,分子量主要集中在400~700.

作 者:李鸿梅 李玉扩 李红 倪鹏 宋欣 徐力 LI Hong-mei LI Yu-kuo LI Hong NI Peng SONG Xin XU Li  作者单位:李鸿梅,LI Hong-mei(吉林大学,分子酶学工程教育部重点实验室,长春,130021;吉林农业大学,食品科学与工程学院,长春,130118)

李玉扩,李红,LI Yu-kuo,LI Hong(吉林农业大学,食品科学与工程学院,长春,130118)

倪鹏,宋欣,徐力,NI Peng,SONG Xin,XU Li(吉林大学,分子酶学工程教育部重点实验室,长春,130021)

刊 名:吉林大学学报(理学版)  ISTIC PKU英文刊名:JOURNAL OF JILIN UNIVERSITY(SCIENCE EDITION) 年,卷(期): 48(2) 分类号:Q516 关键词:玉米源活性肽   分离纯化   2,2-二苯基-1-苦基苯肼(DPPH)自由基   清除作用   corn active peptide   separation and purification   2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical   scavenging effect  

篇5:晚期氧化蛋白产物的分离纯化和鉴定

晚期氧化蛋白产物的分离纯化和鉴定

目的分离纯化以人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)为原料生成的晚期氧化蛋白产物(advanced oxidation protein products,AOPP),即AOPP-HSA,并对其进行鉴定,以寻求一种制备高纯度且具生物活性的`AOPP-HSA的方法.方法采用HSA-HOCl孵育法体外制备AOPP-HSA粗纯品,经凝胶层析和离子交换高压液相层析(high performance liquid chromatography,HPLC)两步层析分离纯化其中的AOPP-HSA,并经紫外和荧光光谱、SDS-PAGE、单核细胞TNF-α分泌实验鉴定其结构特征和生物学活性.结果分离的蛋白质纯度达99.4%,分子质量为700×103,是含有双酪氨酸的蛋白交联聚合物,能够显著刺激单核细胞TNF-α的分泌.结论采用上述两步层析方法能够由粗纯品中成功分离出高纯度并具生物活性的AOPP-HSA,为AOPP的进一步研究奠定了基础.

作 者:孙岩 吴雄飞 金锡御 SUN Yan WU Xiong-fei JIN Xi-yu  作者单位:第三军医大学西南医院肾科,重庆,400038 刊 名:第三军医大学学报  ISTIC PKU英文刊名:ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE 年,卷(期): 28(10) 分类号:Q503 Q51 Q591.2 关键词:晚期氧化蛋白产物   尿毒症毒素   色谱法   凝胶   离子交换   单核细胞  

篇6:中国对虾中抗菌短肽的分离纯化与功能分析

中国对虾中抗菌短肽的分离纯化与功能分析

以水产病害的病原菌为目标菌,从中国对虾(Penaeus chinesis)体液中分离筛选抗菌肽,通过Sephadex G-50、RP-HPLC等分离纯化技术,得到一种抑制水产病原菌的抗菌肽PC-V-2.经初步鉴定,该抗菌肽具有广谱抗性,不仅抗鲁克氏耶尔森氏菌(Yersinia ruckeri),而且对金黄色葡萄球菌(Staphyloccus aureus)、枯草杆菌(Bacillus subttilis)等革兰氏阳性菌,大肠杆菌(Escherichia coli)等革兰氏阴性菌和白色念珠菌(Candida albicans)等真菌也有较强的抗性.另外,该抗菌肽还有一定的.抑制凝血的活性,但没有检测到溶血和丝氨酸蛋白酶抑制活性.经MALDI-TOF质谱分析,其分子量为1 848 D,但其序列及其他生物特性还有待进一步研究.

作 者:安贤惠 梁建国 李卫国 徐春花 吕毅 王旭 董靖 张崇星 张克云 AN Xian-hui LIANG Jian-guo LI Wei-guo XU Chun-hua LU Yi WANG Xu DONG Jin ZHANG Chong-xing ZHANG Ke-yun  作者单位:安贤惠,AN Xian-hui(南京农业大学,生命科学院,江苏,南京,210095;淮海工学院,江苏省海洋生物技术重点实验室,江苏,连云港,222005)

梁建国,徐春花,吕毅,王旭,董靖,张崇星,张克云,LIANG Jian-guo,XU Chun-hua,LU Yi,WANG Xu,DONG Jin,ZHANG Chong-xing,ZHANG Ke-yun(南京农业大学,生命科学院,江苏,南京,210095)

李卫国,LI Wei-guo(淮海工学院,江苏省海洋生物技术重点实验室,江苏,连云港,222005)

刊 名:中国水产科学  ISTIC PKU英文刊名:JOURNAL OF FISHERY SCIENCES OF CHINA 年,卷(期):2006 13(6) 分类号:S94 Q959.223 Q51 R93 关键词:中国对虾   抗菌肽   分离纯化   鲁克氏耶尔森氏菌  

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硫酸软骨素肽的分离纯化和鉴定
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